人紅細胞膜衰變加速因子的分離純化及其生物學活性鑒定

[摘　要] 　目的　獲得純化并具有生物學活性的人紅細胞膜衰變加速因子。方法　經胰蛋白酶消化、正丁醇抽提及DE32和Sepharose 6B 色譜分離等步驟從人紅細胞膜影中分離純化人紅細胞膜衰變加速因子(DAF) 。以SDS2PAGE 及免疫印跡實驗檢測純度及抗原特異性,以C3 轉化酶體外組裝實驗及促衰變活性實驗檢測其補體抑制活性。結果　400 mL 人全血最終可得純化DAF 約370μg ,回收率達10. 4 %;比活性為每毫克2. 24 ×105 units ;純化產物在SDS2PAGE 表現為70 000 u 的單一蛋白條帶,在免疫印跡實驗中可與抗人DAF 單抗特異性結合。在生物學活性實驗中,純化產物既可促進C3 轉化酶衰變,也可抑制C3 轉化酶形成。結論　采用本方法可獲得純化的具有生物學活性的人衰變加速因子。