實驗方法原理 在生理情況下,人和其它哺乳動物的血壓相對穩定,這種相對穩定是通過神經和體液因素的調節而實現的,其中頸動脈竇—主動脈弓壓力感受性反射起著重要作用。此反射既可在血壓升高時降壓,又可在血壓降低時升壓,反射的傳入神經為主動脈神經與竇神經。家兔的主動脈神經為獨立的一條神經,又稱減壓神經,易于分離和觀察其作用。在人、犬等動物,主動脈神經與迷走神經混為一條,不能分離。反射的傳出神經為心交感神經、心迷走神經和交感縮血管纖維,心交感神經興奮,其末梢釋放去甲腎上腺素,去甲腎上腺素與心肌細胞膜上的b受體結合,引起心臟正性的變時變力變傳導作用,心迷走神經興奮,其末梢釋放乙酰膽堿,乙酰膽堿與心肌細胞膜上的M受體結合,引起心臟負性的變時變力變傳導作用,交感縮血管纖維興奮,其末梢釋放去甲腎上腺素,去甲腎上腺素與血管平滑肌細胞膜上的a受體結合,引起阻力血管的收縮。
機體對一定量的急性失血有代償能力。急性失血使動脈血壓下降,血容量減少,在失血的瞬時,通過壓力感受性反射和容量感受性反射,阻力血管、容量血管收縮、心臟活動增強以維持動脈血壓。急性失血引起交感-腎上腺髓質系統興奮,導致兒茶酚胺大量分泌,出現血管的明顯收縮。靜脈系統屬于容量血管,可容納血液總量的60%~70%。靜脈的收縮可以迅速而短暫地增加回心血量。微動脈和毛細血管前括約肌比微靜脈對兒茶酚胺更為敏感,導致毛細血管前阻力比后阻力升高更明顯,毛細血管灌流不足,流體靜壓下降,使組織液進入血管,循環血量增加。抗利尿激素、血管緊張素Ⅱ、皮質激素的產生和分泌增加也參與急性失血的代償。
本實驗應用液壓傳遞系統直接測定動脈血壓。即由動脈插管、測壓管道及壓力換能器相互連通,其內充滿抗凝液體,構成液壓傳遞系統。將動脈套管插入動脈內,動脈內的壓力及其變化,可通過密閉的液壓傳遞系統傳遞壓力,通過壓力換能器將壓力變化轉換為電信號,用微機生物信號采集處理系統記錄動脈血壓變化曲線。
實驗步驟
一、實驗系統連接及參數設置
1. 頸動脈血壓測量記錄裝置。將血壓換能器固定于鐵支柱上,其位置與心臟在同一平面。
2. 安裝好放血裝置使股動脈插管與放血瓶相連(瓶內預先盛60ml生理鹽水),打開三通將放血系統管道內的空氣排出并充滿生理鹽水,然后關上三通。放血瓶內放入肝素0.5ml,記下瓶內液體量,調節放血瓶高度,使瓶內液平面距離頸心臟水平約65 cm處可使血壓維持在6.67 kPa(50 mmHg)左右。
3. 壓力換能器輸出線接微機生物信號處理系統第1或第4通道。
4. 微機生物信號處理系統參數設置:
(1) RM6240系統:點擊“實驗”菜單,選擇“生理科學實驗”菜單中的“兔動脈血壓調節”。系統進入該實驗信號記錄狀態。儀器參數:1通道時間常數為直流,濾波頻率100 Hz,靈敏度12 kPa,采樣頻率800 Hz,掃描速度:500 ms/div。連續單刺激激方式,刺激強度5~10V,刺激波寬2 ms,刺激頻率30 Hz。
(2) PcLab和MedLab系統:點擊“文件”菜單“打開配置”中的“動脈血壓記錄”項目。系統進入該實驗信號記錄狀態。儀器參數:1通道放大倍數200、直流(DC)耦合,采樣間隔1 ms;串刺激方式,波寬2 ms,刺激強度5~10V,時程1s,頻率30 Hz。
5. 血壓換能器定標
實驗室已將儀器和血壓換能器系統進行了定標,無須再定標。定標方法見第七章實驗16。實驗過程中不能改變定標數值。
二、手術準備(參見第四章第一節 動物實驗的基本操作、第四節 實驗動物手術)
1. 家兔稱重后,氨基甲酸乙酯按1g/kg體重的劑量于耳緣靜脈注射麻醉。注意麻醉劑不能過量,注射速度不宜過快。
2. 動物仰臥固定縛于手術臺上,固定四肢,前肢交叉固定,用棉繩鉤住兔門齒,將繩拉緊并縛于兔臺鐵柱上。
3. 暴露頸部氣管、頸總動脈、頸靜脈、迷走神經和主動脈神經。用玻璃分針仔細分離右側上述神經,各穿以不同顏色的細絲線以供識別。分離兩側頸總動脈和兩側頸靜脈,各穿二線備用。
4. 給動物靜脈注射肝素,劑量為1000 U/kg體重。等1分鐘后再進行下一步驟,以使肝素在體內血液中混合均勻。
5. 左頸總動脈插管
頸總動脈遠心端結扎,近心端用動脈夾夾住,用眼科剪在靠近結扎處動脈壁剪一V字形切口,將動脈插管向心方向插入頸總動脈內,扎緊固定。
6. 用左手拇指和另外四指將股部皮膚繃緊固定,沿股腹面正中線從腹股溝下緣向膝部切開皮膚4~5 cm。用止血鉗分離皮下組織,暴露股部肌肉。用玻璃分針分離股動脈,分離出血管約2~3 cm,在其下面穿入2根線,結扎遠心端的血管,近心端用動脈夾夾閉血管。靠近遠心端血管結扎線0.3 cm處,用眼科直剪呈45°角剪開血管直徑的1/3,用彎型眼科鑷夾住切口游離尖端并挑起,插入血管導管2~4 cm,在近心端結扎血管導管。利用遠心端的結扎線再次結扎插管導管。
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