雖然親和層析法是進行特異性抗體純化的,然而有時這種純化方式卻非必需,或者無法實施進行。在大多數錆況下,運鐵蛋白可發生共沉淀或共純化,能用凝膠濾過層析去除之。
本次實驗需要用到的器材有:抗體、SAS、透析膜離心機。
實驗簡明三個步驟:
1、于4℃不斷攪拌下,往2體積的含有IgG的混合物中,逐滴加入1體枳pH7.0的SAS溶液。加完后置于4℃不間斷地攪拌此混合物2~4 h以形成沉淀。2 000 g 離心20 min。
2、用預冷的33% SAS溶液在漩渦混合器上振蕩洗滌沉淀,所用溶液的體積與原含IgG的混合物等體積。
3、在旋渦混合器上溫和振蕩以將沉淀溶于合適的預冷的緩沖液中(5%~10%的原始體積)。4℃透析IgG溶液48 h以上,期間換3次緩沖液(每次換4 L)。