構建λ噬菌體載體的基本原理是多余限制位點的刪除，按照這一基本原理構建的λ噬菌體的派生載體，可以歸納成兩種不同的類型：一種是插入型載體（insertionvectors），只具有一個可供外源DNA插入的克隆位點，另一種是替換型載體（rePlacementvectors），具有成對的克隆位點，在這兩個位點之間的人DNA區段可以被外源插入的DNA片段所取代。
在基因克隆中的二者的用途不盡相同。插入型載體只能承受較小分子量（一般在10kb以內）的外源DNA片段的插入，廣泛應用于cDNA及小片段DNA的克隆。而替換型載體則可承受較大分子量的外源DNA片段的插入，所以適用于克隆高等真核生物的染色體DNA。