實驗方法原理 細胞的形態結構與功能相關是很多細胞的共同特點,在分化程度較高的細胞更為明顯,這種合理性是生物漫長進化過程所形成的。例如:具有收縮機能的肌細胞伸展為細長形;具有感受刺激和傳導沖動機能的神經細胞有長短不一的樹枝狀突起;游離的血細胞為圓形、橢圓形或圓餅形。
實驗材料 蟾蜍人血
試劑、試劑盒 甲苯胺蘭甲基蘭Ringer氏液
儀器、耗材 顯微鏡載玻片蓋玻片手術器材解剖盤鏡臺測微尺
實驗步驟
1. 制備蟾蜍脊髓壓片觀察脊髓前角運動神經細胞。
(1)取蟾蜍一只,破壞腦和脊髓,在口裂處剪去頭部,除去延腦,剪開椎管,可見乳白色脊髓,取下脊髓放在平皿內,用Ringer氏液洗去血液后放在載片上,剪碎。
(2)將另一載片壓在脊髓碎塊上,用力擠壓。
(3)將上面的載片取下即可得到壓片。
(4)在壓片上滴一滴甲苯胺蘭染液,染色10分鐘,蓋上蓋片,吸去多余染液。
(5)在顯微鏡下觀察,染色較深的小細胞是神經膠質細胞。
(6)染成蘭紫色的、大的、有多個突起的細胞是脊髓前角運動神經細胞,胞體呈三角形或星形,中央有一個圓形細胞核,內有一個核仁。
2. 蟾蜍骨骼肌細胞的剝離與觀察
(1)剪開蟾蜍腿部皮膚,剪下一小塊肌肉,放在載片上。
(2)用鑷子和解剖針剝離肌肉塊成為肌束,繼續剝離,可得到很細的肌纖維(肌細胞)。
(3)盡可能拉直肌纖維。
(4)在顯微鏡下觀察,肌細胞為細長形,可見折光不同的橫紋,每個肌細胞有多個核,分布于細胞的周邊。
3. 蟾蜍肝臟壓片的制備與觀察
(1)剪開蟾蜍腹腔,取一小塊(約2~3 mm3)肝放在平皿內,用Ringer氏液洗凈,用鑷子輕壓將肝中的血擠出。
(2)然后放在載片上,制片方法同脊髓壓片。
(3)染色用甲基蘭,顯微鏡下觀察可見肝細胞核染成蘭色,肝細胞緊密排列,擠成多角形。
4. 蟾蜍血涂片的制備與觀察
(1)取一滴蟾蜍血液,靠近一端滴在載片上。
(2)將另一載片的一端呈45°角緊貼在血滴的前緣,均勻用力向前推,使血液在載片上形成均勻的薄層,晾干。
(3)顯微鏡觀察可見蟾蜍紅細胞為橢球形,有核。
(4)白細胞數目少,為圓形。
5. 人血涂片的制備與觀察
(1)取人血一滴,制片方法同上。
(2)顯微鏡觀察可見人紅細胞為凹圓盤形,無核。
(3)自細胞數目少,為圓形。
6. 人口腔上皮細胞標本的制備與觀察
(1)用牙簽刮取口腔上皮細胞均勻地涂在載片上(不可反復涂沫)。
(2)滴一滴甲苯胺蘭染液,染色5分鐘,蓋上蓋片,吸去多余染液。
(3)顯微鏡下觀察可見復蓋口腔表面的上皮細胞為扁平橢圓形,中央有橢圓形核,染成蘭色。
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