1.材料
(1)免疫過的血清抗體滴度高的Balb/c鼠。
單克隆抗體制備流程
(2)1640培養液(3)2.5%FCS-1640營養液
2.操作方法
(1)拉頸或用CO2處死小白鼠。
(2)將小鼠放于70%酒精中浸泡消毒,取出固定于板上,在無菌條件下取脾。
(3)把脾放入5ml含有2.5%FCS的1640液中,冰浴下輕輕洗去脾上的紅血球。
(4)用鑷子輕輕擠壓脾,做成脾細胞懸液,用毛細管將懸液移入小試管中。
(5)直立小試管3min,使大塊的結締組織下沉,把細胞懸液移入離心管中。
(6)以2.5%FCS—1640充滿離心管,并以400g離心7min~10min(與此同時應開始制備骨髓細胞)。
(7)把沉淀用約10ml的新鮮培養液再懸浮。
(8)重復⑹、⑺步驟。
(9)計算細胞,以臺盼蘭染色用相差顯微鏡檢查,活細胞數應高于80%為合格。