該菌營養要求不高，兼性厭氧，最適在含有CO2的微需氧環境中生長，生長溫度范圍—1.5℃-45℃，最適溫度為30℃-37℃，能在普通冰箱冷藏室生長，是一種典型的耐冷性細菌，同時還具有耐鹽性。LM在普通瓊脂平板上呈細小直徑約0.2-0.4μm、半透明露水樣菌落。在血瓊脂平板上有β溶血環。在顯色培養基上呈藍綠色。 [4]
食品中李斯特氏菌的傳統檢驗方法是進行前增菌或選擇性增菌，以分離培養得到的可疑菌落做生化反應實驗、溶血實驗、協同溶血實驗（CAM P）等免疫學檢測，被確定為李斯特氏菌后進一步進行血清分型。該方法中增菌和選擇性增菌是不可缺少的步驟。增菌的方法主要包括：冷增菌法和常溫培養方法。冷增菌法是在4℃培養30d ，有時甚至長達一年。常溫增菌需培養24h 至7d 。故傳統檢測方法需要7-11d 才能分離鑒定出李斯特氏菌，故傳統方法檢測周期較長。