“葉綠體中色素的提取和分離”是高中生物教材中的一個關鍵實驗,理解和記憶內容較多,尤其是其中的一些注意事項是考試中的一個熱點,好的知識和大家一起分享。
一、 為什么要選新鮮綠色的幼嫩葉片?
因為葉綠色含N﹑Mg,而老葉中這兩種礦質元素很多已經分解轉移,所以鮮綠色的幼葉中葉綠素的含量高,適合于實驗.
二、 制備濾紙條要剪去兩角
實驗中需將濾紙條的一端剪去兩角,為什么這樣做,如果不會怎么樣呢? 原來若不剪去濾紙條的兩角,色素帶的兩邊和中間不是在一條直線上。這是由于濾紙條兩邊水分子可以向三個方向散失,向上“跑”的速度快。而濾紙條中間的水分子只能向兩個方向散失,分別是向內和向外,因而會“跑”得慢一些。而現在剪去濾紙條的兩個角,可以在一定程度上加快中間色素的擴散速 度,減慢兩邊色素的擴散速度,從而真正意義上使這些色素從同一起點隨層析液擴散.
三、為什么研磨時加無水乙醇或丙酮?
因為色素是有機物,根據相似相容性原理,無水乙醇或丙酮能溶解色素
四、為什么加入少許二氧化硅?
在提取色素的過程中,要加人少許二氧化硅。原來是為了研磨得充分。二氧化硅就是石英沙子,研磨時可以增大強度,加快細胞和葉綠體的破裂,而使葉綠體中的色素釋放出來。
五、為什么加入少許碳酸鈣?
在提取色素的過程中,要加人少許碳酸鈣。原來是為了防止在研磨時葉綠體中的色素受到破壞。葉綠體中的色素原本所處的環境具微堿性。在實驗中,研磨會使細胞結構遭到破壞,細胞液中有機酸流出,酸性的細胞液就會接觸到葉綠體中的色素,致使葉綠素的分子結構遭到破壞,使葉綠素失鎂,呈黃褐色,如同我們看到到腌制的黃瓜會變色一樣,而碳酸鈣是強堿弱酸鹽,碳酸鈣在水中的溶解度很小,但還是有一部分得到溶解,中和細胞液的酸性,制造了一個弱堿環境,保護了色素。
六、為什么用單層尼龍布過濾?
在過濾時,漏斗基部放一塊單層尼龍布,老教材中是用濾紙來過濾的。過濾的目的是去掉不需要的雜質如破碎的細胞、二氧化硅、碳酸鈣等,相對而言,單層尼龍布可以讓色素溶液更好地通過效果比濾紙要好。
七、 為什么用棉塞塞緊試管?
將色素收集在試管中后,要用棉塞塞緊。原因是色素很容易迅速地被空氣中的氧氣氧化分解乙醇酸和甘氨酸,從而使實驗失敗。
八、 為什么濾紙預先干燥處理?
這是因為干燥的濾紙,使層析液在濾紙上能快速擴散,所以預先干燥處理。
九、為什么濾液細線要直、細、勻?
因為濾液細線只有畫得細而直,才能使色素隨層析液擴散的起點一致,這樣使分離出的色素帶平整不發生重疊.
十、為什么濾液細線干燥后再畫一兩次?
這樣可以分離到更多的色素,使分離出的色素帶清晰分明。
十一、為什么濾液細線不觸及層析液?
這直接關系到實驗的成敗如否,如果發生了這種情況,實驗一定是失敗的.為什么濾液細線不觸及層析液是為了防止色素直接溶解到層析液中,這樣就徹底得不到色素帶了。
十二、從色素帶中我們能得到什么信息?
最上端的橙黃色帶為胡蘿卜素,其次的黃色帶為葉黃素,緊接其下的藍綠色帶為葉綠素a,最下方的黃綠色帶是葉綠素b;最窄的色素帶是胡蘿卜素,最寬的色素帶是葉綠素a;根據實際紙層析各色帶的距離,葉綠素a和葉綠素b胡蘿卜素的距離最小的,葉黃素兩相鄰色素帶距離最大。
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