大鼠哮喘模型的分組及建立
實驗大鼠分組：
根據隨機化原則，將24只雄性Wistar大鼠（體重190-250g） 按體重編號，采取隨機排列表法分為以下4組：（1）正常對照組、（2）哮喘一周組（激發一周）、（3）哮喘兩周組（激發二周）和（4）哮喘四周組（激發四周及以上）。
哮喘模型的建立：
第一天三組哮喘組大鼠每只大腿內側皮下注射OVA懸液1ml（OVA10mg+氫氧化鋁200mg+0.9%生理鹽水至1ml），同時腹腔內注射滅活百日咳桿菌懸液1ml （約6*109個菌株）作為佐劑,第8天重復致敏一次，第15天開始將大鼠置于自制玻璃容器中，隔日用402超聲霧化器（上海四菱醫療器械廠）給于中等霧量的2%的OVA懸液50ml激發30分鐘，每周至少3次，分別按分組激發1周、2周和4周及以上。OVA懸液激發后以大鼠出現煩躁、嗆咳、呼吸加快、行動遲緩或俯伏不動等癥狀以及肺內組織病理切片顯示嗜酸粒細胞、淋巴細胞浸潤，小氣道和小血管收縮為哮喘激發成功。
正常對照組腹腔內注射等量PBS1ml代替OVA懸液,2周后霧化吸入中等霧量的PBS液50ml共30min,每天一次，共15天。
T 淋巴細胞的分離及體外培養
對各組大鼠無菌操作行腸系膜下靜脈穿刺采血10ml,分裝于離心管后用等量PBS液稀釋，然后緩慢加于等體積的淋巴細胞分離液上，使形成層次分明的界面。
2200rpm離心20分鐘，可見層次分明的界面。吸出離心管中間的一層乳白色的液體，加入0.85%的氯化銨以破碎紅細胞并室溫靜置2分鐘，然后用PBS終止反應。 室溫1800rpm離心10分鐘，去除上清。
繼續用PBS稀釋液先后洗滌2次，每次1600rpm離心15分鐘；
去除上清后用含10%胎牛血清的RPMI-1640培養液將沉淀調至1ml并輕輕吹打混勻，置37℃，5%CO2 溫箱孵育1小時；
將細胞懸液進一步用無菌尼龍棉柱37℃，5%CO2 溫箱培養1小時，分離出T細胞，臺盼蘭染色試驗活細胞〉90%；
用含10%FBS的RPMI-1640培養液調整T細胞濃度為2*106/ml,接種于24孔培養板內，每孔各1ml,于5%CO2、37℃培養箱內培養。