1. 對感興趣的組織勻漿，每克組織加 1 ml PME 緩沖液。
PME 緩沖液：
0.1 mol/L PIPES，pH 6.9
2 mmol/L EGTA
1 mmol/L MgSO4
1 mmol/L DTT ( 或 DTE)
0.5 mmol/L GTP
2. 勻漿物以 150000 g 離心 60 分鐘。
3. 小心地轉移上清，避兔任何污染顆粒，它們可能來自于沉淀塊或可能發現于沉淀塊上方的松的小碎片聚集物。
4. 測量上清的體積，調整紫杉醇濃度到 20 μmol/L。
5. 在 37℃ 孵育 15~20 分鐘。
6. 于 37℃ 小心地在溶液下鋪幾毫升含 10% 蔗糖和 10 μmol/L 紫杉醇的 PME 緩沖液。
7. 在 25℃ 以 45000 g 離心 30 分鐘收集組裝了的微管。
8. 去掉上清，用溫的 PME 緩沖液小心地沖洗離心管壁，小心不要打碎微管沉淀物。
9. 用少量含 20 μmol/L 紫杉醇的 PME 重懸沉淀物。
10. 前面步驟 6 和 7 —樣，通過在蔗糖墊層上離心以沉淀微管。 展開 | 