用反轉錄病毒體外轉導1a.用重組反轉錄病毒轉導原初增生人類支氣管細胞（基本方案 2)。轉染細胞三次為最好的轉導。 2a.胰蛋白酶處理原初支氣管上皮細胞（一般接種后 5 山基本方案 1，第 12 步）并接種到異種移植盒（基本方案 5)。 3a.移植異種移植盒到鼠并維持異種移植物（見基本方案 5)。 4a.分化后（一般 4 周），或者用移植物做功能檢測或者收獲他們用來做轉基因表達的組織學分析（支持方案和 CPHG13.9 單元）。一般來說，在最終的再生移植物中，原初細胞中的轉導效率可維持。 用腺病毒進行體內轉染1b.制備重組腺病毒，通過兩個循環的 CsCl 密度梯度離心純化，然后用葡聚糖凝膠 G50 過濾（非透析）脫鹽到 HamF-12 培養基。 2b.立即滴入 100?150jul 純化的病毒（5X10pfu 達到 10% 的轉染率）到完全分化的異種移植物管腔（移植 4 周后）的一端和插入鉻鎳合金線塞的異種移植物關閉端 (基本方案 5)。要想達到大于 95% 的轉染率，每隔一天做一次 16 h 的轉染，共轉染 3 次。 3b.轉染異種移植物 16 h，然后用 ImlHamF-12 培養基沖洗（基本方案 5 第 3 步）。 4b.一般來說，如果要進行異種移植物氣道的功能測定，有必要讓異種移植物從病毒感染所引起劇烈毒力中恢復 48~72 h。 展 | 