檢查
除根據典型病史和臨床表現外，診斷單純皰疹病毒感染的依據有：
(1)水皰液中分離出單純皰疹病毒。
(2)將水皰液、唾液接種在人胚成纖維細胞或兔腎細胞，培養48小時即可作出判斷，并可用免疫熒光技術證實。
(3)在水皰底部刮片行Giemsa染色后，光鏡下見棘突松解，有數個核的氣球形細胞和嗜酸性核內包涵體。
(4)借助PCR技術擴增單純皰疹病毒DNA，診斷可靠。
(5)酶免法檢測孕婦血清及新生兒臍血清中特異IgG、IgM，若臍血中特異IgM陽性，提示宮內感染。
鑒別
主要與硬下疳，軟下疳鑒別：
硬下疳為單個質硬的潰瘍，無疼痛感，無復發史，實驗檢查USR(+)或RPR(+)，梅毒螺旋體可見。
軟下疳為質軟的潰瘍，局部雖有疼痛感但無復發史，實驗檢查鏈桿菌陽性。
其他生殖器部位皮膚病如接觸性帶狀皰疹、白塞病。膿皰病有時與生殖器皰疹相似，可以從病史及檢查方面相區別。