實時熒光定量pcr兩步法與三步法的異同

異同?我覺得還是看你用的機器和試劑盒吧,主要是那個聚合酶的要求。有的推薦兩步法,有的推薦三步法。
比如,ABI,roche都推薦兩步法,tiangen的推薦三步法。
我覺得,如果引物設計時的Tm值如果接近60度(比如用ABI的primer
express設計的引物),就直接用兩步法;如果Tm值不太符合兩步法要求,即60度,還是三步法好些!