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    發布時間:2019-04-05 22:31 原文鏈接: 實驗動物免疫方案

    實驗材料

    兔子 小鼠 大鼠 綿羊 母雞

    試劑、試劑盒

    抗原 Elisa試劑盒 消毒酒精 碘酒

    儀器、耗材

    注射器 針頭 一次性手套 剪刀 鑷子 動物固定架 塑料放血管 試管 血管夾 離心機 冰箱 手術器械

    用免疫學的基本理論和技術來診斷、預防和治療疾病,并在此基礎上開展的采用人工方法向機體輸入由他人或動物產生的免疫效應物,如免疫血清、淋巴因子等,使機體立即獲得免疫力。其特點是產生作用快,輸入后立即發生作用。但由于該免疫力非自身免疫系統產生,易被清除,故免疫作用維持時間較短,一般只有2~3周。主要用于治療和應急預防。

    1、抗原: 蛋白質、多肽、細胞器、細胞、組織等。


    2、免疫方式:皮下注射、腹腔注射、靜脈注射、肌肉注射等。


    3、不同動物免疫所需抗原量(以蛋白免疫為例)



    >18-20kDa<18-20kDa
    動物抗原量最佳抗原量抗原量最佳抗原量
    兔子20-20010050-400200
    小鼠2- 40154- 6040
    大鼠10-503020-15050
    綿羊100-1000200200-1000400
    母雞20-20010050-400200
    單位:微克


    4、免疫方案(以免疫兔子為例) :


    天數0142838566687
    注射xxx
    x

    采血2ml

    2ml
    2+20ml2+50-70ml


    5、注意:


    第一次免疫用完全佐劑與免疫原混合,以后加強免疫用不完全佐劑與免疫原 混合,采取多點,時間間隔式免疫法。


    如果用細胞免疫兔子,那么每次免疫所需細胞量為 2-3 x 107cells。 在連續免疫完三次后,需要少量取血進行ELISA檢測,檢測所免疫動物的抗 體滴度,一般滴度能達到 1:10,000-50,000。在處死所免疫的動物前一周應加 強一次免疫。


    如果用小鼠免疫,可以尾靜脈小量采血(大約 50μ l) ,最后取眼球大量采血 (大約 500-1000μ l) ;如果用兔子免疫,可以耳緣靜脈小量取血(大約 2mL), 最后心臟大量取血(50-100mL)。


    按血清制備的標準方法將血清分離,并且分裝成小份,儲藏在- 80oC。



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