| 實驗步驟 | 用于2-DE 時，膠條應該散于重泡脹池（圖 3, ld) 中在含 5mol/L 尿素的溶液（或2mol/L 硫脲和 5mol/L 尿素）中泡脹。溶液其成分為 0,5% 到 4% 非離子（NP-40,Triton X-100) 或兩性 (CHAPS) 去污劑、 15mmol/LDTT 和 0.5% 適宜范圍的 pH 值的SCA。然后將膠條直接放在水平平板電泳裝鈕的冷卻板裝面 (圖 3.lg) 。另外一種便利的方法是用 Phsmiaria 公司的泡脹托架（圖 3.lh), 這種托架用波紋塑料板塑造，上面所含的凹槽正好適于 IPG 的排列擺放。此外，該設備配備有帶有電極條和框架 (bar) 以及配備加樣杯的支架。 可以在膠條表面任意位置加樣。必要時，可以將托架用硅油覆蓋，以在 IEF 時保護膠條使之不受大氣影響。在 2-DE 圖譜堿性端常可以見到水平條紋，特別是當在一向使用堿性 IPG 梯度時，在 IPG 膠表面沿陰極區額外疊加一個用 20mmol/L DTT 浸泡過的電極條，可以解決這個問題。該方法的優點是， IEF 時膠內 DTT 向陽極遷移，從陰極區外加電極條釋放出來的 DTT 可以不斷進行補充。另外一種避免陰極區條紋的方法是利用不帶電荷的還原劑 TBP, 它在 IEF 時不發生遷移，已發現在 IEF 中 TBP 可以大大提高蛋白質的溶解能力，特別是羊毛蛋白。  
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