實驗概要
常用貯存液的配制
實驗步驟
1．30%丙烯酰胺溶液
【配制方法】
將29g丙烯酰胺和1g N，N’-亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為60ml的水中。加熱至37℃溶解之，補加水至終體積為100ml。用Nalgene濾器（0.45μm孔徑）過濾除菌，查證該溶液的pH值應不大于7.0，置棕色瓶中保存于室溫。
【注意】
丙烯酰胺具有很強的神經毒性并可以通過皮膚吸收，其作用具累積性。稱量丙烯酰胺和亞甲雙丙烯酰胺時應戴手套和面具。可認為聚丙烯酰胺無毒，但也應謹慎操作，因為它還可能會含有少量未聚合材料。
一些價格較低的丙烯酰胺和雙丙烯酰胺通常含有一些金屬離子，在丙烯酰胺貯存液中加入大約0.2體積的單床混合樹脂（MB-1Mallinckrodt），攪拌過夜，然后用Whatman 1號濾紙過濾以純化之。
在貯存期間，丙烯酰胺和雙丙烯酰胺會緩慢轉化成丙烯酰和雙丙烯酸。
2．40%丙烯酰胺
【配制方法】
把380g丙烯酰胺（DNA測序級）和20g N，N’-亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為600ml的蒸餾水中。繼續按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法處理，但加熱溶解后應以蒸餾水補足至終體積為1L。
【注意】
見上述配制30%丙烯酰胺的說明，40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列測定。
3 ． 0.1mol/L腺苷三磷酸（ATP）溶液
【配制方法】
在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH調至pH值至7.0，用蒸餾水定容1ml，分裝成小份保存于-70℃
4．10mol/L乙酸酰溶液
【配制方法】
把770g乙酸酰溶解于800ml水中，加水定容至1L后過濾除菌。
5 ．10%過硫酸銨溶液
【配制方法】
把1g過硫酸銨溶解于終量為10ml的水溶液中，該溶液可在4℃保存數周。
6．2×BES緩沖鹽溶液
【配制方法】
用總體積90ml的蒸餾水溶解1.07g鹽溶液BES[N，N-雙（2-羥乙基）-2-氨基乙磺酸]、1.6g NaCl和0.027g Na2HPO4，室溫下用HCl調節 該溶液的pH值至6.96、然后加入蒸餾水定容至100ml，用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成小份，保存于-20℃。
7．1mol/L CaCl2溶液
【配制方法】
在200ml蒸餾水中溶解54g CaCl2·6H2O，用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成10ml小份貯存于-20℃。
【注意】
制備感受態細胞時，取出一小份解凍并用蒸餾水稀釋至100ml，用Nalgene濾器（0.45μm孔徑）過濾除菌，然后驟冷至0℃。
8．1mol/L二硫蘇糖醇（DTT）溶液
【配制方法】
用20ml 0.01mol/L乙酸鈉溶液（pH5.2）溶解3.09g DTT，過濾除菌后分裝成1ml小份貯存于-20℃。
【注意】
DTT或含有DTT的溶液不能進行高壓處理。
比色杯光徑為25px時,吸光度=εM
9． 0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液
【配制方法】
在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二鈉（EDTA-Na·2H2O），在磁力攪拌器上劇烈攪拌，用NaOH調節 溶液的pH值至8.0（約需20g NaOH顆粒）然后定容至1L，分裝后高壓滅菌備用。
【注意】
EDTA二鈉鹽需加入NaOH將溶液的pH值調至接近8.0，才能完全溶解。
10． 溴化乙錠（10mg/ml溶液）
【配制方法】
在100ml水中加入1g溴化乙錠，磁力攪拌數小時以確保其完全溶解，然后用鋁箔包裹容器或轉移至棕色瓶中，保存于室溫。
【注意】
小心：溴化乙錠是強誘變劑并有中度毒性，使用含有這種染料的溶液時務必戴上手套，稱量染料時要戴面罩。
11．2×HEPES緩沖鹽溶液
【配制方法】
用總量為90ml的蒸餾水溶解1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2PO4·2H2O、0.2g葡聚糖和1gHEPES，用0.5mol/l NaOH調節 pH值至7.05，再用蒸餾水定容至100ml。用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成5ml小份，貯存于-20℃。
12． IPTG溶液
【配制方法】
IPTG為異丙基硫代-β-D-半乳糖苷（分子量為238.3），在8ml蒸餾水中溶解2g IPTG后，用蒸餾水定容至10ml，用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成1ml小份貯存于-20℃。
13． β-巰基乙醇（BME）溶液
【配制方法】
一般得到的是14.4mol/L溶液，應裝在棕色瓶中保存于4℃。
【注意】
BME或含有BME的溶液不能高壓處理。
14． NBT溶液
【配制方法】
把0.5g氯化氮藍四唑溶解于10ml 70%的二甲基甲酰胺中，保存于4℃。
15． 酚/氯仿溶液
【配制方法】
把酚和氯仿等體積混合后用0.1mol/L Tris·HCl(pH7.6)抽提幾次以平衡這一混合物，置棕色玻璃瓶中，上面覆蓋等體積的0.01mol/l Tris·HCl(pH7.6)液層，保存于4℃。
【注意】
酚腐蝕性很強，并可引起嚴重灼傷，操作時應戴手套及防護鏡，穿防護服。所有操作均應在化學通風櫥中進行。與酚接觸過的部位皮膚應用大量的水清洗，并用肥皂和水洗滌，忌用乙醇。
16．磷酸鹽緩沖溶液（PBS）溶液
【配制方法】
在800ml蒸餾水中溶解8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,用HCl調節 溶液的pH值至7.4加水定容至1L，在15lbf/in2(1034×105Pa)高壓下蒸氣滅菌20min。保存于室溫。
17．1mol/L乙酸鉀（pH7.5）溶液
【配制方法】
將9.82g乙酸鉀溶解于90ml純水中，用2mol/L乙酸調節 pH值至7.5后加入純水定容到1L，保存于-20℃。
18．乙酸鉀溶液（用于堿裂解）
【配制方法】
在60ml 5mol/L乙酸鉀溶液中加入11.5ml冰乙酸和28.5ml水，即成鉀濃度為3mol/L而乙酸根濃度為5mol/L的溶液。
19． 3mol/L乙酸鈉（pH5.2和pH7.0）溶液
【配制方法】
在80ml水中溶解408.1g三水乙酸鈉，用冰乙酸調節 pH值至5.2或用稀乙酸調節 pH值至7.0，加水定容到1L，分裝后高壓滅菌。
20．5mol/L NaCl溶液
【配制方法】
在800ml水中溶解292.2g NaCl加水定容至1L，分裝后高壓滅菌。
21．10%十二烷基硫酸鈉（SDS）溶液
【配制方法】
在900ml水中溶解100g電泳級SDS，加熱至68℃助溶，加入幾滴濃鹽酸調節 溶液的pH值至7.2，加水定容至1L，分裝備用。
【注意】
SDS的微細晶粒易擴散，因此稱量時要戴面罩，稱量完畢后要清除殘留在稱量工作區和天平上的SDS，10%SDS溶液無須滅菌。
22．20×SSC溶液
【配制方法】
在800ml水中溶解175.3g NaCl和88.2g檸檬酸鈉，加入數滴10mol/l NaOH溶液調節 pH值至7.0，加水定容至1L，分裝后高壓滅菌。
23．20×SSPE溶液
【配制方法】
在800ml水中溶解17.5g NaCl、27.6g NaH2PO4·H2O和7.4g EDTA，用NaOH溶液調節 pH值至7.4（約需6.5ml 10ml/L NaOH），加水定容至1L，分裝后高壓滅菌。
24．100%三氯乙酸溶液
【配制方法】
在裝有500g TCA的瓶中加入227ml水，形成的溶液含有100%（M/V）TCA。
25．1mol/L Tris溶液
【配制方法】
在800ml水中溶解121.91g Tris堿，加入濃HCl調節 pH值至所需值。
pH HCl
7.4 70ml
7.6 60ml
8.0 42ml
應使溶液冷至室溫后方可最后調定pH值，加水定容至1L，分裝后高壓滅菌。
【注意】
如1mol/L溶液呈現黃色，應予丟棄并置備質量更好的Tris。
盡管多種類型的電極均不能準確測量Tris溶液的pH值，但仍可向大多數廠商購得合適的電極。
Tris溶液的pH值因溫度而異，溫度每升高1℃，pH值大約降低0.03個單位。例如：0.05mol/L的溶液在5℃、25℃、和37℃時的pH值分別為9.5、8.9和8.6。
26．Tris緩沖鹽溶液（TBS）（25mmol/l Tris）
【配制方法】
在800ml蒸餾水中溶解8g NaCl、0.2g KCl和3g Tris堿，加入0.015g酚并用HCl調至pH值至7.4，用蒸餾水定容至1L，分裝后在151bf/in2(1.034×105Pa)高壓下蒸汽滅菌20min，于室溫保存。