1.大劑量地塞米松抑制試驗
是目前用于確定過量ACTH來源的主要方法，服藥后UFC或血皮質醇水平被抑制50%以上為陽性。庫欣病患者在服藥第二日UFC（尿自由皮質醇）或17-羥皮質類固醇水平可以被抑制到對照日的50%以下，其診斷符合率約為80%；而腎上腺腺瘤或腺癌患者一般不能被抑制到50%以下；異位ACTH綜合征患者大多不被抑制，但某些支氣管類癌患者例外。過夜大劑量地塞米松抑制試驗的結果與經典法相似，且有快速、簡便的優點。
2.血漿ACTH水平測定
腎上腺皮質腫瘤不論良性還是惡性，其血漿ACTH水平均低于正常值低限，而ACTH依賴性的庫欣病及異位ACTH綜合征患者，其血漿ACTH水平均有不同程度的升高。因此，血漿ACTH水平測定對鑒別ACTH依賴性和非依賴性有肯定的診斷意義，但對鑒別是來源于垂體性還是異位的ACTH分泌增多卻僅能作為參考。
3.去氨加壓素（DDAVP）興奮試驗
去氨加壓素是V2和V3血管加壓素受體激動劑，可用于鑒別庫欣病和異位ACTH綜合征。該試驗是CRH興奮試驗的替代試驗，敏感性及特異性均低于CRH興奮試驗，用于無法獲得CRH試劑時。
4.CRH（促腎上腺皮質激素釋放激素）興奮試驗
給垂體性庫欣病患者靜脈注射合成的羊或人CRH后，血ACTH及皮質醇水平均顯著上升，其增高幅度較正常人明顯；而大多數異位ACTH綜合征患者卻無反應。所以，本試驗對這兩種ACTH依賴性的庫欣綜合征的鑒別診斷有重要價值。
5.雙側巖下竇插管測ACTH或ACTH相關肽的水平
對鑒別異位ACTH綜合征與垂體性庫欣病，以及對異位ACTH分泌瘤的定位有診斷意義。并對垂體ACTH瘤是在垂體左側還是右側的定位有重要意義。是創傷性介入檢查，建議只在經驗豐富的醫療中心由有經驗的放射科醫師進行。
6.影像學檢查
（1）蝶鞍區影像學檢查 蝶鞍區磁共振或CT掃描對垂體大小及是否有腺瘤頗有幫助。磁共振對于垂體病變的診斷優于CT，推薦對所有ACTH依賴性庫欣綜合征患者進行垂體增強磁共振或垂體動態增強磁共振檢查。
（2）腎上腺影像學檢查 包括B超、CT、磁共振及放射性碘化膽固醇掃描等，首選雙側腎上腺CT薄層（2～3mm）增強掃描。
（3）異位ACTH綜合征病灶影像學檢查 由于大部分引起異位ACTH綜合征的腫瘤位于肺或縱隔內，因此胸部X線、CT掃描等檢查十分必要。生長抑素受體顯像也可用于異位ACTH綜合征的腫瘤定位。