一、反應物自身因素
1.抗原：理化性狀、分子量、抗原表位的種類及數目均可影響反應結果。
顆粒性抗原出現凝集反應，可溶性抗原出現沉淀反應，單價抗原與相應抗體結合不出現沉淀現象。
2.抗體：濃度、特異性、親和性和等價帶的寬窄都影響抗原抗體反應。
應選擇高特異性、高親合力的抗體作為診斷試劑。但單克隆抗體不適用于沉淀反應。
二、環境因素
1.振蕩：適當振蕩也可加速反應。
2.酸堿度：抗原抗體反應一般在pH6～9之間進行。
3.電解質：抗原抗體反應時常用0.85%NaCl或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液。
4.溫度：一般為15～40℃，常用反應溫度為37℃，如高于56℃，可導致已結合的抗原抗體解離，甚至變性或破壞。