影響生化檢驗質量因素的探討

如果將生化檢驗比喻為一臺天平，用它來稱量樣品里物質的多少。那么，校準品無疑是這桿稱的法碼，則儀器和方法是這桿稱的臂和支點。由此可以看出實驗的準確度與校準品的直接關系，實驗的精密度和靈敏度與儀器和方法學有關系。我們醫院檢驗科從20世紀70年代開始就參加了上級部門臨檢中心的室間質評。在1991～1994年全省室間評價中，我們取得了較好的成績，被評為全省生化間質評優秀實驗室。1996～1999年全省生化室間質評中，我們同樣以優異的成績，獲得全省生化室間質評優秀實驗室的殊榮。尤其近幾年，我們在二十多個質評項目中，每次PT幾乎是100%。這與我們平時注重生化質量管理，維護生化檢驗系統長期相對穩定有關。下面，我主要從儀器、校準品和生化試劑這三個重要因素談談體會。

1 維護好儀器使之處于穩寂靜和良好的狀態

我院從20世紀50年代開展生化檢驗室以來，檢驗科的生化設備也與日俱進，不斷增新。生化儀從光電比色計581開始，經歷了721光電比色計，進口半自動生化分析儀，到現在已是AU600全自動生化分析儀四代。電解質分析也經歷了比濁法、火焰光度法和離子電極選擇法三個換式。這也呈現了這20年來我國檢驗事業日新月異地發展的一個縮影。不管設備儀器怎樣更新維護和使用這好這些設備是我們的一項日常性的工作。首先要熟讀使用手冊，我常幾十遍的讀，溫故而知新。要了解各各件的工作原理觀察儀器結構。比如說，以往使用721分光光度計時，每月都要檢查波長是否準確，比色皿是否配套。每年計量局年檢時，我們的儀器都是優良狀態。使用電解質分析儀時，我們每周都要記錄各電解質高度濃度的my差值以了解各電極的狀態，以便即時更換。參比電極的好壞對電解質分析儀的精密度至關重要。儀器狀度良好時，兩點定標在倒計時55秒至45秒內穩定，出現測寂靜定值。如果時間延長，測定強果的重復性變差。這時應更換參比電極內光液(飽和氯化鉀液)或更換參比電極。又如，我們在使用AU600全自動分析儀時，我們十分注意到儀器的保養和維護問題，做到每天工作完后沖洗儀器一次，每周定期小檢查及沖洗一次，每月大檢查及沖洗一次，這樣能夠及時發現問題，減少污染，保證儀器正常運轉。以上事例說明，我們要熟練使用儀器就必須熟讀說明書，了解儀器處于一個良好的穩定狀態。

2 生化試剖的質量和穩定性

生化檢驗的方法學一經確定，我們檢驗人員通常都關注廠家的試劑質量和效期。現在試劑廠家數以千計，配方各自保密。同一原理配方也有差異或改良，產品質量參差不齊，我們需按法規選擇有三證的大廠家的試劑產品，但仍要注意以下問題。(1)有效期指地污染且貯存在2～8℃的環境。(2)開蓋使用后就不能說無污染，酶活力和抗體效價可因使用時間下降，可使屢敏度或工作曲線發生改變。(3)堿性試劑可吸收空氣中二氧化碳可改變試劑的酸堿度。除以上因素外，還可能有諸多因素影響我們實驗的工作曲線，我們不得不經常用校準來糾正我們的實驗誤差。比如說用苦味酸法測定肌肝，氫氧化鈉濃度可逐漸降低，質控品濃度逐漸下降，這個項目我們通常每3天就校準一次。綜上所述，環境、試劑使用時間等諸多因素我們使用的試劑的靈敏度發生改變。我們的工作曲線須經常校準。各項目的試劑因時間改變不一致。各項目的校準頻度也是值得我們摸索的一個問題。

3 校準品的質量與穩定

校準品是試劑廠家使用二級標準品為靶值轉移得到的一種溶液或溶質。通常有單一的溶液或復合的凍干血清。主要用來校準常規儀器，交給所測樣品賦值。它相當于天平中的法碼，可謂差之毫厘，謬之千里，特別在兩點校準中較為突出。天平中的法碼是穩定的，我們使用的校準樣品是不穩定的，酶活力會逐漸下降，膽紅素過光會分解，一些物質在溶液中也可能分解或聚合。還有廠家間的轉移誤差，批間差。使得我們使用的校準品不盡人意。我們為了校準有一個穩定的、可靠的結果，我們選用了英國朗道生產的復合凍干校準血清。一般都是高低濃度值各一盆購進，每盆20瓶，每瓶5ml。每瓶用1ml塑料離心管分裝后凍于凍箱內，可用1個月。雖然很貴，但用起來方便、穩定，較為準確，能保持2年不變。一具穩寂靜的校準品對于樣品的賦值也將帶來一個穩定的結果，一個穩定的結果通過室間質評后，用對比，統計的分析方法可使我們檢測結果準確度有一個極大的提高。

《國家實驗室管理辦法》和一系列質量管理文件，對我們實驗室的工作提出了基本要求。我們的工作應逐項按法規來做，這是在實驗內部的工作。另一方面，我們實驗室的樣準品和試劑幾乎全都來自廠商。國內外生產醫學檢驗試劑的廠商數以千計，國內恐怕也有數百家。國內廠家生產試劑，有進口分裝的，有的自配的，原料試劑的來源恐怕也各不相同，生產的配方也可能不一致或有改良。試劑的純度，酶活力和抗體的純度和濃度是否能達到標準化。再經過經銷商的輾轉貯存和運輸。使我們所用的校準品和試劑的質量常常出現不穩定，校準時出現靈敏度低報警。在眾多的廠商和試劑經銷商面前，我們臨床檢驗工作者對其校準品和閉幕式劑的質量和穩定性真是良莠難辨。

如果我們有高穩定性和高質量的復合校準血清和試劑，我們生化實驗室的工作將取得事半功倍的效果。全國有統一的實驗室操作規程，但我們所用的試劑和校準品難以統一，我認為，放免試劑的生產和供應方法值得生化檢驗學習。在信息化和交通日新月異發展的今天是很容易做到的。首先，應由衛生部臨床實驗室的大規模廠家。根據全國各實驗室的不同儀器，不同的業務量生產復合校準血清 和沒規格的試劑。每年各實驗室可根據自己的業務情況向此廠家估定每月的試劑需求量，以利于廠家每月定時生產和定時用特快專遞郵出試劑校準品和質控品到全國各個臨床實驗室。這樣使我們所用試劑的使用控制在一個多月范圍內。這樣做的好處很多:(1)實驗室所用校準品、試劑和質控品來源的穩定，試劑生產出來就開始用，幾乎沒有貯存期，這相應地提高了試劑和校準品的質量，也提高了檢驗質量。(2)按需生產避免浪費，生產日期可信度高。(3)規模化生產可降低生產成本。(4)省去了中間供應商這一環節。(5)全國各臨床實驗室測定結果可比性增強。希望這種有利于提高檢驗質量和事情能引起有關主管部門的高度關注。