OD值不能計算絕對濃度，因為懸濁液的濃度、菌株的透光度、這些都是不同的，所以不能用1個OD值代表每毫升菌液含有多少細胞。一般情況下，OD600是追蹤液體培養物中微生物生長的標準方法。以未加菌液的培養液作為空白液，之后定量培養后的含菌培養液。為了保證正確操作，必須針對每種微生物和每臺儀器用顯微鏡進行細胞計數（也就是一樓所說的計數板法），做出校正曲線。通常我們實驗室采用的都是OD600，如果你的實驗要求特別高，可以先用紫外跑一個最大吸收峰，確定最大吸收波長，然后再用此波長進行濃度測定.
