感受態細菌細胞的轉化采用氯化鈣的方法。
不含有質粒的大腸桿菌菌株在室溫下使其解凍并加入40mL S.O.C 的液體培養基。在37 ℃培養1h , 然后將其轉移到37 ℃搖床上以200r /min 速度培養2 ～3h， 直到OD600 達到0.2 ～ 0.4。
不同細菌菌株的最適宜OD600 是不同的。在4 ℃下以8000r /min 的速度離心1min， 然后用一半體積(20 mL)已滅菌的預冷的TB(CaCl2)溶液進行懸浮, 并在冰上保存25 min。
如上進行另一次離心后，所得到的細胞沉淀用十分之一體積(4mL)預冷的TB (CaCl2)溶液進行懸浮獲得感受態細胞。感受態細胞可于4 ℃下保存3d。