檢查的項目不同，所使用的抗凝劑也不同。實驗室常用的抗凝劑和使用方法如下。
1.乙二胺四乙酸（EDTA ）鹽：常用其鈉鹽或鉀鹽，能與血液中鈣離子結合成螯合物，而使Ca2+失去凝血作用，從而阻止血液凝固。EDTA鹽對血細胞形態和血小板計數影響很小，適用于多項血液學檢查。但EDTA影響血小板聚集，不適合于作凝血象檢查和血小板功能試驗。
2.草酸鹽：常用的有草酸鈉、草酸鉀和草酸銨，它們溶解后解離的草酸根與標本中的鈣離子形成草酸鈣沉淀，使Ca2+失去凝血功能。草酸鈉通常用0.1mol/L濃度，與血液按1：9比例使用，過去主要用于凝血象檢查。但草酸鹽對凝血V因子保護功能差，影響凝血酶原時間測定效果；草酸鹽與鈣結合形成的沉淀物，影響自動凝血儀的使用。因此，凝血象檢查宜選用枸櫞酸鈉為抗凝劑。
3.肝素：肝素是生理性抗凝劑，廣泛存在于肺、肝、脾等幾乎所有組織和血管周圍肥大細胞和嗜堿性粒細胞的顆粒中。其抗凝機制較為復雜，主要是加強抗凝血酶Ⅲ滅活絲氨酸蛋白酶的作用，從而阻止凝血酶的形成，并有阻止血小板聚集等多種抗凝作用。肝素具有抗凝力強、不影響血細胞體積、不易溶血等優點。除有些因素會干擾凝血機制檢查項目外，絕大多數的檢查都可用肝素作為抗凝劑，它是紅細胞透滲脆性試驗理想的抗凝劑。盡管肝素可以保持紅細胞的自然形態，但由于其常可引起白細胞聚集，并使血涂片在羅氏染色時產生藍色背景，因此肝素抗凝血不適合血液學一般檢查。
4.枸櫞酸鹽：主要為枸櫞酸鈉，凝血試驗時枸櫞酸鹽能與血液中的鈣離子結合形成螯合物，從而阻止血液凝固。枸櫞酸鈉與血液的比例為1∶9.枸櫞酸鹽在血中的溶解度低，抗凝力不如前幾種抗凝劑。多用于臨床血液學檢查，一般用于紅細胞沉降率和凝血功能測定。因其毒性小，也是輸血保養液的成分之一。