建議4 推薦以HEp-2細胞為實驗基質的IIF法是進行ANA檢測的參考方法和首選方法。
建議5 采用以HEp-2細胞為實驗基質的IIF法進行ANA檢測時，HEp-2細胞在實驗基質中每顯微鏡視野(放大倍數為200倍)應可見3～5個有絲分裂細胞；二抗應使用熒光素標記的抗人IgG抗體；IIF法檢測ANA的稀釋方法可根據不同的檢測試劑而采用倍比稀釋系統或稀釋系統。
建議6 ANA特異性自身抗體可采用多種免疫學方法檢測，不同的方法具有不同的臨床應用優缺點。
建議7 抗ds-DNA抗體檢測使用綠蠅短膜蟲為實驗基質的IIF法、ELISA和放射免疫法。若其他方法檢測抗ds-DNA抗體陽性與臨床表現不符合時，建議采用IIF法或放射免疫法進行進一步確認。對SLE的疾病活動性進行監測時，應定期使用同種定量檢測方法進行抗ds-DNA抗體的檢測。
建議8 在ANA的臨床應用中可先用IIF法進行ANA檢測，若結果陽性，需進一步進行ANA針對靶抗原的特異性自身抗體檢測。當臨床高度疑診時，不論ANA總抗體的檢測結果如何，都需要對針對靶抗原的特異性自身抗體進行檢測。
IIF-ANA熒光模型分類、命名
目前，根據ICAP提出的關于ANA熒光模型分類、命名共識，IIF-ANA熒光模型分為3類：細胞核熒光模型(14種)、細胞漿熒光模型(9種)和細胞有絲分裂熒光模型(5種)，所有熒光模型都被賦予一個唯一AC(anti-cell)開頭的編碼。為確保具有重要臨床意義的熒光模型被準確識別(如細胞核致密斑點型)，以及根據熒光模型判讀難易程度不同，ICAP將ANA熒光模型分為必報熒光模型和選報熒光模型。基于ANA熒光模型的國際分類和命名原則，結合國內ANA檢測的臨床實踐現狀(自身免疫性肝病在中國的發病率較高，核膜型和細胞漿線性/肌動蛋白型作為自身免疫性肝病的重要自身抗體在臨床檢測中常見；我國從事自身抗體檢測的專業人員能對這兩種核型有正確的識別能力)，將核膜型和細胞漿線性/肌動蛋白型這兩種易判讀且具有重要臨床意義的ANA納入必報熒光模型。本共識建議必報熒光模型13種包括：細胞核均質型、細胞核斑點型(需區分細胞核致密斑點型)、著絲點型、核點型、核仁型、細胞漿纖維型、細胞漿顆粒型、細胞漿網狀/線粒體型、細胞漿極型/高爾基體型、細胞漿棒環狀型、核膜型和細胞漿線性/肌動蛋白型，選報熒光模型15種，見圖1。
注：AC指抗細胞(anti-cell)，基于抗核抗體的國際分類和命名原則，結合我國目前檢測的臨床現狀，建議黃色部分為必報熒光模型，綠色部分為選報熒光模型
▲圖1 IIF-ANA熒光模型分類及命名
建議9 IIF-ANA熒光模型分為3類：細胞核熒光模型(14種)、細胞漿熒光模型(9種)和細胞有絲分裂熒光模型(5種)。必報熒光模型包括：細胞核均質型、細胞核斑點型(需區分細胞核致密斑點型)、著絲點型、核點型、核仁型、細胞漿纖維型、細胞漿顆粒型、細胞漿網狀/線粒體型、細胞漿極型/高爾基體型、細胞漿棒環狀型、核膜型和細胞漿線性/肌動蛋白型。
ANA檢測結果報告
根據第2屆ICAP達成的共識及我國ANA檢測的臨床實踐現狀，IIF-ANA檢測結果報告應包括：檢測方法、定性結果(陽性/陰性)、熒光模型、滴度及必要的臨床建議。對于混合熒光模型，熒光模型的報告優先級順序為細胞核熒光模型、細胞漿熒光模型、細胞有絲分裂期熒光模型。相同優先級的熒光模型，建議按滴度高低順序依次報告。自身抗體檢測實驗室的ANA結果報告形式基于ANA的最新定義，將HEp-2細胞胞漿熒光模型及細胞有絲分裂期熒光模型納入ANA陽性結果。其報告格式范例見表1。
表1 IIF-ANA檢測結果報告范例
IIF-ANA檢測結果判讀及報告的技術主管應有專業技術培訓(如專業學會組織的培訓、進修學習等)及考核合格記錄(如考核認證的合格證及崗位培訓證等)，其他從事此項工作的技術人員應有定期培訓的考核記錄，應定期進行人員間結果判讀比對。采用ELISA等其他檢測方法的ANA檢測結果應包括檢測結果的定量數值和單位、參考區間及必要的臨床建議。ANA針對靶抗原的特異性自身抗體檢測結果報告應包括檢測方法、定性結果(若為定量檢測方法應包含定量數值和單位)及參考區間，同時應包括必要的臨床建議。
臨床意義及解讀
ANA陽性常見于各種AID患者，特別是系統性(非器官特異性)AID，也可見于器官特異性AID、感染、腫瘤患者及健康人群等。熒光模型是IIF法檢測ANA結果的重要檢測參數，與其針對的靶抗原在細胞內分布相關。雖然特定熒光模型與某些ANA針對靶抗原的特異性自身抗體、AID及特定臨床表現存在一定的相關性，對進行下一步針對靶抗原的特異性自身抗體的檢測具有一定的指導意義，但并非完全一致，不能僅從熒光模型來推斷針對靶抗原的特異性自身抗體或AID。
建議10 IIF-ANA檢測結果報告應包括：檢測方法、定性結果(陽性/陰性)、熒光模型、滴度及必要的臨床建議。對于混合熒光模型，熒光模型的報告優先級順序為細胞核熒光模型、細胞漿熒光模型、細胞有絲分裂期熒光模型。相同優先級的熒光模型，建議按滴度高低順序依次報告。
建議11 IIF-ANA檢測結果判讀及報告人員應有培訓、考核及定期進行結果判讀比對。
建議12 采用ELISA等其他檢測方法的ANA檢測結果應包括檢測結果的定量數值和單位、參考區間及必要的臨床建議。
建議13 ANA針對靶抗原的特異性自身抗體檢測結果報告應包括檢測方法、定性結果(若為定量檢測方法應包含定量數值和單位)及參考區間，同時應包括必要的臨床建議。
由于機體自身正常的免疫應答反應，產生生理性的自身抗體。因此，ANA滴度(量值)與疾病相關性無明確定論，但ANA滴度(量值)越高與AID的相關性越大。ANA滴度(量值)與病情沒有必然聯系，不推薦使用ANA滴度(量值)的變化來反映AID的活動性和療效反應性。但對于某些ANA針對靶抗原的特異性自身抗體，如抗ds-DNA抗體滴度可作為SLE疾病活動性的監測指標之一，應定期進行監測。不同廠家試劑可采用不同的滴度(量值)系統，不同滴度系統不能直接進行滴度值的比較，但部分檢測項目可溯源到國際單位(IU/ml)后能進行比較。ANA針對靶抗原的特異性自身抗體對AID的診斷與鑒別診斷、病情監測與療效觀察、病程轉歸與預后判斷及疾病預警等方面具有重要的臨床意義，見表2。
表2 ANA常見特異性自身抗體相關靶抗原及其主要相關AID
注：ANA為抗核抗體，AID為自身免疫病，ds-DNA為雙鏈DNA，DFS為致密斑點，SSA為干燥綜合征抗原A，SSB為干燥綜合征抗原B，snRNP為核內小核糖核蛋白，nRNP為核糖核蛋白，Sm為斯密斯抗原，tRNA為轉移核糖核酸
建議14 熒光模型對進行下一步針對靶抗原的特異性自身抗體的檢測具有一定的指導意義，但并非完全一致，不能僅從熒光模型來推斷針對靶抗原的特異性自身抗體或AID。
建議15 不推薦使用ANA滴度(量值)的變化來反映AID的活動性和療效反應性。不同廠家試劑可采用不同的滴度(量值)系統，不同滴度系統不能直接進行滴度值的比較，但部分檢測項目可溯源到國際單位(IU/ml)后能進行比較。