實驗方法原理
生活的細菌在明視野顯微鏡下觀察是透明的，不易看清。暗視野顯微鏡的原理與來自縫隙的一束強光通過暗室時，可清楚地看到其中細微灰塵的現象是一樣的，即給樣品照明的光不直接穿過物鏡，而是由樣品上反射或折射的光進入物鏡，那么，在漆黑的視野中，由于反差增大了，使樣品能夠看得更清楚。因用暗視野法可以在黑暗的視野中看到光亮的菌體，故在觀察生活細菌及細菌運動時常采用此法。
暗視野顯微鏡的構造主要是采用一種特殊的聚光器，在聚光器的下方中央為圓形黑盤所遮，光僅由周緣進入，使光會聚于載玻片上，并斜照物體，物體經斜射照明后，發出反射光可進入物鏡，這樣，造成顯微鏡視野黑暗，而其中的物體明亮。如無暗視野顯微鏡時，只需將明視野顯微鏡上的聚光器取下，換上暗視野聚光器即可；也可在明視野顯微鏡聚光器下面的濾光鏡支架上放一片星形擋板（star diaphragm）構成暗視野，這種方法適用于低倍鏡觀察。