杜氏鹽藻多糖的高效體積排阻色譜的保留特性及其分析方法的研究

摘要:通過對從杜氏鹽藻中提取出的不同多糖級分在高效體積排阻色譜柱(Waters Ult rahydragel Linear ,718 mmi. d. ×300 mm ,2 根串聯) 上的保留特性的考察及其分離分析條件的優化,建立了高效體積排阻色譜分析鹽藻多糖平均相對分子質量及其分布的方法。結果表明:流動相中鹽的種類及其濃度、p H 值對3 種酸性多糖級分(特別是硫酸化多糖級分PD4a) 的保留行為有顯著影響;在柱溫為45 ℃,流速為019 mL/ min 條件下,使用011 mol/ L 的NaAc 水溶液作流動相基本上能消除非特異性吸附作用及分子間締合等因素的干擾,使各多糖級分基本以非締合狀態按立體排除機制保留和分離。在優化的色譜條件下,測得的鹽藻多糖5 個級分的重均相對分子質量( Mw ) 分別為1 548 000 ,33 000 ,67 000 ,424 000 ,10 000 ;測得的硫酸化多糖級分PD4a 的Mw 和峰面積的相對標準偏差分別為117 %和0188 %( n = 5) 。