實驗概要
1、了解果蠅生活史中各個不同階段的形態特點;
2、區別雌雄果蠅以及幾種常見突變類型的主要性狀特征;
3、掌握實驗果蠅的飼養、管理及實驗處理方法和技術。
實驗原理
1、果蠅的生活史 果蠅屬于昆蟲綱,雙翅目,果蠅屬,與家蠅是不同的種。 果蠅的生活周期長短與溫度關系很密切。30℃以上的溫度能使果蠅不育和死亡,低溫則使它的生活周期延長,同時生活力也降低,果蠅培養的最適溫度為20-25℃。
10℃ | 15℃ | 20℃ | 25℃ | |
卵?幼蟲 | 8天 | 5天 | ||
幼蟲?成蟲 | 57天 | 18天 | 6.3天 | 4.2天 |
從表中可以看出,25℃時,從卵到成蟲約10天;在25℃時成蟲約活15天。 卵:羽化后的雌蠅一般在12小時后開始交配,兩天后才能產卵。卵長0.5mm,為橢圓形,腹面稍扁平,在背面的前斷伸出一對觸絲,它能使卵附著在食物(或瓶壁)上,不致深陷到食物中去。 幼蟲:從卵孵化出來后,經過兩次蛻皮,發育成三齡幼蟲,此時體長可達4-5mm。肉眼可見其前端稍尖部分為頭部,上有一黑色斑點即為口器。口器后面有一對透明的唾液腺,透過體壁可見到一對生殖腺位于軀體后半部上方的兩側,精巢較大,外觀上是一明顯的黑點,而卵巢則較小,可以此作為鑒別。幼蟲活動力強而貪食,它們在培養基上爬行時,留下很多條溝,溝多而且寬時,表明幼蟲生長良好。 蛹:幼蟲生活7-8天準備化蛹,化蛹前從培養基上爬出,附著在瓶壁上,逐漸形成一梭形的蛹.在蛹前部有兩個呼吸孔,后部有尾芽,起初蛹殼顏色淡黃而柔軟,以后逐漸硬化,變為深褐色,表明即將羽化了。 成蟲:幼蟲在蛹殼內完成成蟲體型和器官的分化,最后從蛹殼前端爬出。剛從蛹殼里羽化出來的果蠅蟲體比較長,翅膀尚未展開,體表尚未完全幾丁質化,故呈半透明的乳白色。透過腹部體壁,可以看到黑色的消化系統。不久,變為短粗圓形,雙翅展開。體色加深。如野生型初為淺灰色,然后呈灰褐色。
2、形態構造 頭部有一對復眼,三個單眼和一對觸角;胸部有三對足,一對翅和一對平衡棒;腹部背面有黑色環紋,腹面有腹片,外生殖器在腹部末端,全身有許多體毛和剛毛。 3、成蟲雌雄的鑒別
性狀 | 雌果蠅 | 雄果蠅 |
體 型 | 較大 | 較小 |
第一對足跗節 | 無性梳 | 有性梳 |
腹末端 | 鈍而圓 | 稍尖 |
腹 片 | 6個 | 4個 |
腹背面條紋 | 5條 | 3條 |
外生殖器 | 簡單 | 復雜 |
4、果蠅常見的幾種突變形狀特征
突變形狀名稱 | 基 因 符 號 | 形 狀 特 征 | 所在染色體 |
白眼 | w | 復眼白色 | X |
棒眼 | B | 復眼橫條形 | X |
檀黑體 | e | 體呈烏木色,黑亮 | IIIR |
黑體 | b | 體呈深色 | IIL |
黃身 | y | 體呈淺橙黃色 | X |
殘翅 | vg | 翅退化,部分殘留不能飛 | IIR |
焦剛毛 | sn | 剛毛卷曲如燒焦狀 | X |
小翅 | m | 翅較短 | X |
5、果蠅的性別決定 (1)染色體組成 果蠅為二倍體2n=8。核內有絲分裂:不涉及細胞分裂和核分裂的染色體分裂方式。體聯會:一些特殊的體細胞中(如果蠅唾腺細胞)的染色體經多次復制卻不分開,依舊緊密地排列在一起就象減數分裂中的聯會現象一樣。染色體組:來自二倍體生物的正常配子的所有染色體。連鎖群:來自配子中的每條染色體及其攜帶的基因。雌雄基因平衡理論:對果蠅而言,X染色體上有決定雌性的基因,常染色體上有決定雄性的基因存在,其比值決定果蠅的雌或雄,Y染色體只與育性有關,而與性別無關。
(2)果蠅的性別決定 果蠅的性別決定為XY型,Y染色體在性別決定上不起作用,只與育性有關。含有Y染色體,可產生正常的配子,不含Y染色體,則配子不育。性別決定與性比值(性指數)有關。 X/A=1 則為雌性;X/A=0.5 則為雄性。 X/A>1,為超雌;X/A<0.5,則為超雄;0.5<X/A<1則為中間性。 雌雄基因平衡理論:果蠅X染色體上有很多雌性基因,常染色體上有很多雄性基因,Y染色體上很少或沒有與性別決定有關的基因,因此性別決定于基因的平衡。
(3)果蠅的連鎖群 X染色體上有141個基因;第2染色體上有228個基因;第3染色體上有156個基因;第4染色體上有12個基因。
(4)同源染色體:來源相同、結構相似、控制的形狀相同,在減數分裂中配對的一對染色體。
主要試劑
果蠅培養基、乙醚等。
主要設備
雙目解剖鏡、放大鏡、小鑷子、麻醉瓶、白瓷板、新毛筆等。
實驗材料
黑腹果蠅。
實驗步驟
1、培養基的配制 果蠅培養基的配置(1000ml用量)
玉米面 | 紅糖 (或蔗糖) | 瓊脂 | 干酵母 | 丙酸 |
85g | 65g | 8.5g | 7g | 5ml |
水溶瓊脂→加紅糖(或蔗糖)→加攪好的玉米面→煮沸→加水到1000ml→冷卻→50℃左右加入酵母粉→加入丙酸(防腐劑)。 配制好的培養基進行高壓滅菌,121℃,20min,待用。
2、果蠅培養 將每3-5對雌雄果蠅轉入待用培養基中,進行培養,隔天觀察其生長情況,視其生長周期。
3、果蠅的性狀觀察 對果蠅進行檢查時,可用乙醚麻醉,使它保持靜止狀態。因為果蠅對乙醚很敏感,易麻醉,麻醉的深度看實驗的要求而定(作種蠅以輕度麻醉為宜,做觀察可深度麻醉,致死也無妨。果蠅翅膀外展45度角表示已死亡)。 麻醉的方法是將果蠅轉移到干凈的三角瓶中,迅速加入滴有適量乙醚的濾紙條,蓋上瓶塞,稍等片刻果蠅便麻醉。
4、記錄觀察結果 將麻醉后的果蠅倒在白瓷板上檢查,分辨雌雄蠅,觀察各種突變形狀特征。觀察完畢,將全部果蠅倒入煤油或酒精瓶中(死蠅盛留器),統一處理。
將觀察到的果蠅常見突變形狀特征填在下表中