柱層析色譜法
近年來,柱層析色譜柱法是糖脂分離廣泛采用的一種分離方法。例如Chia-Chung Hou等,以民間昭和草為原料,將乙酸乙酯萃取相,以氯仿.甲醇為洗脫劑,進行正向硅膠柱層析得到分餾物8,取分餾物8再次進行C18反相硅膠柱層析,以95%甲醇為洗脫劑,得到富含亞麻酸的甘油糖脂成分。
柱層析色譜法雖然可以大量的處理樣品,但是存在不可逆吸附嚴重、分離效率低、耗時長且溶劑消耗量大等缺點。
由于同一類糖脂間的差別僅僅體現在酰基脂肪酸組成的不同,分子帶電性、分子極性等性質非常接近,用現有的方法很難把單個糖脂從混合糖脂中大量分離出來。所以,從化學品市場上無法購買到完全單一的天然標準糖脂,各大化學品公司以及專門提供脂類標準品的公司都僅僅能提供TLC級別的混合糖脂標準。而只有將混合糖脂中每一個成分的含量結構研究清楚,才能使有關研究(如生物活性)更為深入。因此有必要尋找一種能耗低、分離效率高、大量提取糖脂單一組分的新方法,才能適應于神經生物學研究及臨床應用研究的需要。
逆流色譜是近三十年來發展起來的一種液-液色譜技術 [5] 。它的優點之一是不使用固體吸附材料,可以避免其它色譜技術中那種不可逆吸附、樣品降解等缺點;優點之二是能對樣品完全回收。作為實驗室的一種分離制各技術,逆流色譜已表現出高效液相色譜無法比擬的優點,如對樣品的純凈度要求低,進樣量大,操作簡便等。