植物細胞死活鑒定

1、 用質壁分離法鑒定細胞死活

（1） 原理

活細胞與死細胞在性質上有許多差別，特別是透性的變化最為明顯，活細胞的原生質具有分別透性；而死細胞則為通透性。分別透性是質壁分離的先決條件，因此能發生質壁分離的細胞就表示是活的，不能發生質壁分離的則說明是死的。

（2） 儀器藥品及材料

洋蔥及其它植物  材料、酒精燈、顯微鏡、小刀、鑷子、玻璃片、1M蔗糖

（3） 實驗步驟

撕洋蔥表皮細胞滴加1M蔗糖中，在顯微鏡下觀察，細胞很快發生質壁分離的，這就是活細胞活著的證據。另把撥取的同樣制片，用冷凍，加熱，干燥，酒精浸蘸等辦法將它們的細胞殺死，然后取代上述活材料，做質壁分離實驗，結果看到已死的細胞，不能發生質壁分離現象。

用尿素、KNO3、CaCl2等來代替蔗糖，能快速鑒定細胞死活。

2、 活體染色法鑒定細胞死活

（1）原理

死活細胞間不但透性不同，而且PH等情況也不同，他們對某些染料的反映明顯不同，某些染料能在活細胞的細胞液中積累而不染活原生質，但能使死細胞的原生質染色而無積累于液泡的現象，所以可根據某些染料活體染色的情況來鑒定細胞死活。

（2）儀器、藥品及材料

顯微鏡、鑷子、載玻片、刀片、0.01％中性水溶液、1M蔗糖溶液、小麥、洋蔥、水稻、白菜、棉花或其它植物。

（3）實驗步驟

（4）取洋蔥或其它材料，用鑷子撕下表皮（如表皮不易撕下，也可在水中用鋒利的刀片輕輕刮去多余分部分），或用刀片作切片若干，將表皮或切片浸入中性溶液5－10分鐘，取出用清水浸洗后置于載玻片水滴內，加蓋玻片，在顯微鏡下觀察。

活細胞一般在液泡內染成紅色至紫色，原生質不染色，死細胞常成橙紅色，原生質和細胞核  染色。撕破的細胞，只剩細胞壁時，呈淡紅色或淡紫色。

為了進一步鑒別死活，可把玻片上的水溶液吸去，滴一滴1M蔗糖溶液，便可觀察到活細胞能發生質壁分離，死細胞及空細胞都沒有這種現象。

可用加熱，冷凍或其它辦法殺死植物組織，然后用上面所述方法進行處理，比較與活組織有何不同。

記錄結果，并加以解釋。