1、硫酸妥布霉素氯化鈉注射液與其他氨基糖苷類合用，可增加耳毒性、腎毒性以及神經肌肉阻滯作用。可能發生聽力減退，停藥后仍可能進展至耳聾；聽力損害可能恢復或呈久性。神經肌肉阻滯作用可導致骨骼肌軟弱無力、呼吸抑制或呼吸麻痹（呼吸暫停），用抗膽堿酯酶藥或鈣鹽有助于阻滯作用恢復。
2、硫酸妥布霉素氯化鈉注射液與神經肌肉阻滯藥合用，可加重神經肌肉阻滯作用，導致肌肉軟弱、呼吸抑制或呼吸麻痹（呼吸暫停）。與代血漿類藥如右旋糖酐、海藻酸鈉，利尿藥如依他尼酸、呋塞米及卷曲霉素、順鉑、萬古霉素等合用，或先后連續局部或全身應用，可增加耳毒性與腎毒性，可能發生聽力損害，且停藥后仍可能發展至耳聾，聽力損害可能恢復或呈永久性。
3、硫酸妥布霉素氯化鈉注射液與頭孢噻吩合用可能增加腎毒性。
4、硫酸妥布霉素氯化鈉注射液與多粘菌素類合用，可增加腎毒性和神經肌肉阻滯作用，神經肌肉陰滯作用可導致骨骼肌軟弱無力，呼吸抑制或呼吸麻痹（呼吸暫停）。
5、硫酸妥布霉素氯化鈉注射液不宜與其他腎毒性或耳毒性藥物合用或先后應用，以免加重腎毒性或耳毒性。