毛細管區帶電泳色譜儀(CZE)的整個系統采用同一種緩沖液充滿,以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用荷電粒子之間的淌度差異進行分離,是CEzui基本、應用最廣的分離模式。
CZE中,粒子的電荷性質不同,電泳方向不同;粒子的電荷數量不同,電泳速度不同;粒子的分子量不同,電泳速度不同。在毛細管中,由于電滲流的存在,所有粒子都隨電滲流一起向負極遷移,電滲流速度約是一般離子電泳速度的5~7倍。各種電性粒子在毛細管中的遷移速度分別為:
1、陽離子:vap = veo+ vep,陽離子電泳方向與電滲流方向一致。
2、陰離子:vap = veo-vep,陰離子電泳方向與電滲流方向相反。
3、中性粒子:vap = veo,中性粒子運動方向與電滲流方向一致。
當樣品從陽極端注入毛細管時,不同電性的粒子將按不同速度向負極遷移,從負極端先后流出毛細管,出峰順序依次是陽離子、中性粒子和陰離子。中性粒子無電泳現象,隨電滲流同行,在陽離子后流出,但不同結構的中性粒子無法相互分離(電泳圖上是一個峰)。
電滲流在CZE中起著極其重要的作用:
1、電滲流具有象HPLC中泵一樣的作用,推動粒子前進,加上不同粒子電泳速度和方向的差異,完成陽離子、陰離子和中性粒子的分離。
2、改變電滲流速度的大小和方向,可改變分離效率和選擇性。這是CZE優化分離的重要因素。
3、電滲流速度的微小變化會影響分離結果的重現性(遷移時間和峰面積)。