一、流式細胞術在基礎血液學中的應用
（一）血細胞的計數和分類研究
1．紅細胞的計數、分類及其功能的研究
（1）循環的紅細胞總量的測定：
生物素—逆轉抗生物素蛋白—FITC系統的特異性和流式細胞 儀（FCM）的敏感性結合起來，建立了FCM測定人紅細胞總量的方法，此方法具有標本用量少，無放射性的優點，適用于兒童和孕婦測定循環紅細胞總量。
（2）網織紅細胞總數：
外周血網織紅細胞計數（百分數和絕對值）是一反映骨髓紅系增生活性的常用指標。許多學者先后提出應用FCM和不同的RNA特異性熒光染料自動計數網織紅細胞的方法，如派若寧Y、AO、溴化乙啶、thiazole orange等。
目前最普遍應用的是 thiazoie orange 染色法，這種特異性RNA
的激發波（488nm）測量的特點，與人工計數法相比，它不但能得到網織紅細胞的百分數和絕對值，而且還能獲得網織紅細胞成熟指數（RMI）。RMI是一個檢測骨髓功能的獨立實驗室指標，它與網織紅細胞內RNA含量成正比，RMI可成功地用于評價骨髓移植的效果。
目前，FCM檢測網織紅細胞主要用于
1）預測骨髓移植的效果；
2）解釋各種紅系增長低下性貧血的發病原因;
3）評價某些新的重組生物制劑的治療效果。
2．白細胞計數、分類及其功能的研究
（1）白細胞計數和分類
FCM方法避免常規染色過程中，由于細胞漂洗和分類溶解所致的人工假象，提供了可靠的評價血液狀態的第一手資料，并進一步篩選細胞亞群、測定其他參數。LDS-751、CD45、thiazole orange
（2）中性粒細胞的功能
FCM可在單個細胞水平上定量測定中性粒細胞的功能變化，有助于了解白細胞在感染性疾病、自身免疫性疾病、惡性疾病的作用和診斷意義。
（3）血小板功能的研究：
FCM可檢測血小板膜抗原，如CD41a、CD42b、CD36、CD62p、CD63等。應用流式細胞術檢測這些單克隆抗體的變化可用于：
a、評價血小板功能狀態;
b、探測循環血液中激活的血小板;
c、探測血小板自身抗體。
如對原發性血小板減少性紫癜、慢粒急變和再障病人的血小板自身抗體的檢測中發現，病人均可探測到IgM型自身抗體，有的病人可同時伴有IgM或IgA自身抗體，后者血小板減少更明顯。因此，IgG血小板免疫熒光檢查是檢測自身免疫反應的敏感和特異指標，它可直接測定自身免疫性血小板減少病人的血小板表面免疫球蛋白，進行血小板交叉配型，以此為有自身免疫反應的病人選擇合適的供血者。
（二）正常骨髓各系血細胞特點的研究
1．造血干細胞的特點：
FCM多參數分析可以探測常規形態檢查方法不能確認的造血干細胞。
2．紅細胞系統的特點：
FCM系統地觀察了紅系統表面特異性抗原（Hle-1、CD71和Glycophorin
A）核酸及紅細胞體積的變化來研究紅系在正常骨髓分化成熟的規律。Glycophorin
A常作為紅細胞晚期的特征，出現在有核紅細胞，此時可與體積相似的淋巴細胞進行鑒別，Glycophorin
A在成熟紅細胞達到最大值，不再隨紅細胞的成熟而變化。CD71表達介于Hle-1和Glycophorin A之間，在Glycophorin
A出現之前，達到最大值。Hle-1主要表達在最早期可鑒別的紅細胞上，隨著紅細胞的成熟而逐漸減少，紅系隨著成熟細胞體積逐漸減少的物理特點，可由FCM的前向散射光來測得。另外，在CD71和Glycophorin
A成熟紅細胞中，DNA含量逐漸減少，以至只含有RNA，失去CD71成為成熟紅細胞。
3.粒細胞的特點
（1）區別正常粒細胞和白血病克隆；
（2）確定白血病是以粒系為主，還是以單核細胞為主；
（3）探測粒細胞白血病的異質性。
4.巨核細胞的特點
應用FCM同時觀察巨核細胞的體積，內部結構，DNA含量以及膜表面抗原在細胞分化成熟中的變化。
5.正常骨髓B細胞的分化和成熟
Ⅰ期：CD19、CD34、HLA-DR、TdT、CD10、Ig基因重排
Ⅱ期：失掉CD34、核TdT，CD10減弱，HLA-DR強度增加4倍，
同時表達HLA-DP和CD45 、CD19
Ⅲ期：CD20、HLA-DQ、SigM、CD19
Ⅳ期：CD19、CD21、CD22，不表達CD10
6.正常骨髓漿細胞的特點
兩群：一群體積較小，表達CD22、CD35和SigE，是早期漿細胞。
另一群體積較大，膜抗原表達有明顯異質性。
7.正常骨髓細胞DNA含量與細胞表型
S期：紅系>粒系>單核系>淋巴系
淋巴系統中，S期的T細胞百分率明顯低于B細胞