隨著血液分析儀的推廣和普及,血液分析儀越來越廣泛地應用于臨床血常規分析中。血細胞分析儀具有快速、方便、重復性好、工作效率高等優點,但是由于自身檢測原理的限制以及血小板易于粘附、聚集、破壞等特點,血細胞分析儀測定血小板時常常會出現假性減少現象,這是臨床經常反映的問題。為此,現將血細胞分析儀計數血小板出現假性減少的原因進行簡單的探討。
1.計數血小板方法學的缺陷造成:準確計數血小板實非易事。迄今為止,所有計數血小板的方法,對于血小板減少的標本,其準確性都比較差,都存在不少缺陷。自動化的血液分析儀,無論是阻抗法還是光散射法,對于血小板數及形態正常的標本,結果一般比較可靠,但是對于血小板明顯減少和/或形態異常者,所得結果誤差甚大,有時甚至難以計數。其原因是:這些方法基本上都是依據細胞的大小進行區分和計數的,而正常人的血小板體積相差甚大,可自2fl至20fl以上,其體積分布直方圖不是對稱的,而是明顯地向右延伸,即都存在一定數量的大血小板。在病理情況下,大血小板會更多地增加。由于大部分血液分析儀不能將大血小板與小紅細胞等分開,致使許多大血小板被當成紅細胞而未計入血小板總數中,從而使血小板計數結果偏低1。
2.血小板的生理特性造成:血小板為多功能的細胞,在生理止血及某些病理過程中起著重要作用。由于血小板的特點易于粘附、聚集,當標本中血小板體積偏大和俄聚集成較大顆粒時,血小板被誤認為小紅細胞而未計入血小板總數中,從而使血小板計數結果偏低2。
3.采集血液標本不順利造成:采血過程影響血小板計數的準確性,采血速度和出血是否順利是保證血小板數目準確的關鍵。手指采血時若方法掌握不當,如采血速度慢、出血不暢、擠壓采血部位等,都會造成假性血小板減少3。靜脈經多次穿刺而引起的水腫及皮下出血時,因組織損傷,組織凝血因子混入血液標本中產生肉眼看不見的小凝塊,是造成血細胞分析儀計數血小板出現假性減少的常見原因之一,所以對血小板減少患者應注意閱片,必要時重新采血4。
4.標本放置時間不足造成:在實際工作中,采取標本后立即進行檢測,有時會出現血小板計數假性減少現象。這是由于血小板離體后,其形態立即發生變化,其外膜形成的微小管游離端向外伸展,從而在血小板周圍形成絲狀偽足,數個這樣的血小板偽足相互纏繞,形成血小板可逆聚集體,其體積一般和淋巴細胞大小相似。由于這種血小板不被溶血劑溶解,故而使血小板計數暫時減少,隨著時間的延長,這種假性聚集發生一定程度的解聚,所以,為了提高準確性,建議在采血后放置15~20min再測定可得到準確結果5 6 7 。
5.抗凝劑EDTA的影響造成:按照國際血液學標準化委員會(ICSH)的建議,1.5~2.2mg的EDTA-2K抗凝1ml的全血可以抑制血小板聚集,從而達到抗凝的目的。但有極少數人的血小板在用EDTA抗凝時,反而會出現血小板聚集,這種EDTA依賴性假性血小板減少可能與血漿中存在的抗血小板抗體和/或抗心磷脂抗體等自身抗體有關,但無任何病理、生理意義,也與特殊藥物使用無關,多發生在腫瘤患者、自身免疫病、肺心病、晚期孕婦、肝病、毒血癥及一些不明原因疾病,此現象是其他疾病發生的伴隨現象,因其出現于其他疾病開始或治療過程中,故隨著疾病好轉而消失。另一種現象是血小板粘附于白細胞上的“血小板衛星現象”,它是由于白細胞表面的IgG或Fc段與血小板表面的GPⅡb/Ⅲa結合所致,與疾病和藥物也無關。對于這類標本,只能換用非EDTA抗凝劑進行重新計數,比如枸櫞酸鹽或在EDTA抗凝血中加入肝磷脂1。
6.高鎂血癥及脂類與蛋白的聚集體造成:臨床上常用MgSO4來預防控制妊高征子癇的發作及用于治療先兆子癇及子癇患者,其治療的有效血鎂濃度為1.0~3.0mmol/L3。高濃度的鎂離子有類似鈣離子的生理作用,通過改變血小板胞內CAMP水平而引起血小板的聚集,造成血小板計數假性降低。脂類與蛋白的聚集體,多因低密度脂蛋白和載脂蛋白β100可促進血液高凝狀態,血液凝固因子活性增強,纖溶性降低,血小板聚集性增高而引起假性血小板減少。
血小板計數對血栓與出血性疾病的診斷和治療有重要的參考價值。血細胞分析儀計數血小板具有快速、簡便、重復性好等優點,然而,血小板易于粘附、聚集、破壞等諸多因素,常常造成血小板計數假性減少,從而給臨床準確診斷疾病帶來困難。針對此種情況,在實際工作中,要排除一些干擾因素,以便準確測定混有大血小板、血小板聚集等異常血液標本的血小板數,進一步保證異常血液標本中血小板檢測結果的準確性,為臨床提供可靠的診療依據。
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