大鼠海馬神經元細胞分離自海馬體,海馬體,又名海馬回、海馬區、大腦海馬,海馬體主要負責記憶和學習。海馬神經元細胞是海馬區的主要細胞組成,主要功能是參與近期記憶、情緒及內臟功能調節、是老年性癡呆、癲癇等疾病的主要病灶之一。
海馬屬于大腦的邊緣系統,在學習、記憶、情緒反應及神經系統疾病的病理生理變化等方面有重要作用,而且海馬組織是神經系統內主要的神經干細胞聚集區,具有高度序化板層結構和神經元相對獨立分布的特點,境界相對清晰,便于取材,因此,海馬神經元體外培養模型被廣大基礎醫學和臨床醫學研究者當做理想的實驗模型。
大鼠海馬神經元細胞的組織來源于實驗小鼠的正常腦組織,因為該細胞類似于干細胞屬于高分度分化的細胞特性,具有不能傳代,不能增殖等特點,所有收到細胞后盡快使用。
海馬神經元細胞的分離培養方法:
1、取1-10d的新生小鼠。用75%的乙醇浸泡;
2、在冰浴的PBS中分離海馬,PBS洗滌3次,剪碎;
3、用0.25%Trypsin+0.1%Ⅰ型膠原酶37℃水浴振蕩消化30min;
4、用FBS終止消化,輕輕吹打;
5、過100μm濾網;
6、收集濾液,300g離心5min;
7、用完全培養基重懸沉淀,鋪瓶。
大鼠海馬神經元細胞培養是研究神經細胞生物學特性和外源干擾因素作用(細胞因子)的有效細胞模型,其在神經生物學,發育生物學體外實驗研究中已被廣泛應用。
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