1) 腫瘤細胞培養物制成懸液,并稀釋至需要的細胞濃度.
2) 于微量試驗班的小孔內分別接種0.2ml腫瘤細胞(內含5×102)個細胞,37℃培育24h.
3) 細胞貼壁后,輕輕輕去培養基,加1mlPBS洗滌,輕去洗滌液及未貼壁細胞.
4) 向小孔分別加入0.2ml不同濃度的淋巴細胞(分別含有5×105個細胞,5×104個細胞,5×103個細胞),使淋巴細胞與癌細胞之比依次為1000:1、100:1、10:1.
5) 45min后加0.1ml5%胎牛血清,37℃繼續培養2-3天.
6) 2%臺盼藍染色,翻轉微量試驗班,計數活存的腫瘤細胞,并設正常人淋巴細胞代替腫瘤患者淋巴細胞作對照,每份需同時做3個復孔,分別檢查各孔中存活活細胞數,按下列公式計算細胞毒率,并做t檢驗.