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    發布時間:2020-07-14 09:46 原文鏈接: 離心分離PCR后樣品

    用Hitachi CR—G離心機,R10H轉頭分離PCR后(DNA或其他生物大分子)樣品

    A液:20%PEG6000,2.5M NaCl 及Isopropanol (異丙醇)

     

    分離步驟:

    1.用384孔板或96孔板,按比例增加容量,在PCR儀中擴增反應后

    2.每孔內含10ul PCR后樣品及10ul A液

    3.微板先用搖床充分混勻。

    4.對稱加入P10H轉頭(二塊或四塊,384孔板)

    5.離心10,000rpm(約13,000xg)×10分,4℃,加速“9”,減速“9”

    6.取出微孔板

    7.用Kimtowels 紙貼在R10轉頭放微板架的內壁

    8.去掉微板蓋并把微板倒過來放入R10H 轉頭微板架。

    9.預置轉速1000rpm,10分,4℃,加速“9”,減速“9”,在速度顯示到達300rpm時停車。

    10.從微板中取出轉頭,沉淀可作出進一步實驗。

     

    特點:1. 轉速高(一般微板轉頭都在5000rpm,4000xg以下)回收率高。

       2. 沉淀緊,反向低速離心后上清全部被紙吸干。

       3. 用于DNA測序前樣品制備最合適。


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