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    發布時間:2022-09-27 15:28 原文鏈接: 糖脂化合物的分離純方法介紹

    大孔吸附樹脂法

    大孔吸附樹脂法主要用來樣品的粗分離,獲得的產物是糖脂混合物,很難得到單一化合物。例如曹東旭等以鯉魚魚頭糜為糖脂原料,將90%乙醇萃取物用H P-20大孔吸附樹脂進行分離,分別用90%的乙醇和氯仿洗脫,得到的90%乙醇洗脫液物再用HP-20大孔吸附樹脂進行分離,依次用70%的乙醇和95%的乙醇洗脫,將95%乙醇的洗脫液收集、濃縮,即為糖脂濃縮物質。


    高效薄層層析法

    Murakami等以泰國中草藥酸橙的新鮮葉子為原料,將得到的乙酸乙酯萃取相,進行葡聚糖凝膠C-100柱層析,洗脫劑為丙酮濃度依次提高的丙酮/甲苯溶液,得到60-80%的丙酮洗脫物。然后,將洗脫物進行反相硅膠柱層析,依次以甲醇/水(9:1,v/、r)、甲醇/乙腈/水(16:4:5,v/v~)為洗脫劑,得到含甘油糖脂DLGG和LPGG的混合物,進一步進行高效薄層層析制備硅膠板分離,得到甘油糖脂單體DLGG和LPGG。高效薄層層析要分離得到糖脂單一組分通常需要大量反復提取,而且提取量少,很難滿足糖脂結構鑒定和生物活性的進一步研究。


    柱層析色譜法

    近年來,柱層析色譜柱法是糖脂分離廣泛采用的一種分離方法。例如Chia-Chung Hou等,以民間昭和草為原料,將乙酸乙酯萃取相,以氯仿.甲醇為洗脫劑,進行正向硅膠柱層析得到分餾物8,取分餾物8再次進行C18反相硅膠柱層析,以95%甲醇為洗脫劑,得到富含亞麻酸的甘油糖脂成分。

    柱層析色譜法雖然可以大量的處理樣品,但是存在不可逆吸附嚴重、分離效率低、耗時長且溶劑消耗量大等缺點。

    由于同一類糖脂間的差別僅僅體現在酰基脂肪酸組成的不同,分子帶電性、分子極性等性質非常接近,用現有的方法很難把單個糖脂從混合糖脂中大量分離出來。所以,從化學品市場上無法購買到完全單一的天然標準糖脂,各大化學品公司以及專門提供脂類標準品的公司都僅僅能提供TLC級別的混合糖脂標準。而只有將混合糖脂中每一個成分的含量結構研究清楚,才能使有關研究(如生物活性)更為深入。因此有必要尋找一種能耗低、分離效率高、大量提取糖脂單一組分的新方法,才能適應于神經生物學研究及臨床應用研究的需要。


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