堿度取本品0.10g,加水150m1,振搖,依法測定(通則0631),pH值應為8.0~10.5。有關物質照高效液相色譜法(通則0512)測定pH8.0磷酸鹽溶液取磷酸氫二鉀11.5g,加水900ml使溶解,用10%磷酸溶液調節pH值至8.0,用水稀釋成1000ml 供試品溶液取本品約40mg,置10m1量瓶中,加甲醇ml使溶解,用pH8.0磷酸鹽溶液稀釋至刻度,搖勻。對照溶液精密量取供試品溶液1ml,置100ml量瓶中用pH8.0磷酸鹽溶液-甲醇(3:2)稀釋至刻度,搖勻。系統適用性溶液(1)取紅霉素標準品約40mg,置10ml量瓶中,加甲醇4ml使溶解,用pH8.0磷酸鹽溶液稀釋至刻搖勻。系統適用性溶液(2)取紅霉素系統適用性對照品omg,置10ml量瓶中,加甲醇4ml使溶解,用pH8.0磷酸鹽溶液稀釋至刻度,搖勻。靈敏度溶液精密量取對照溶液適量,用pH8.0磷酸鹽溶液甲醇(3:2)定量稀釋制成每1ml中約含4g的溶液色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑( XTerraRPC18柱,4.6mm×250mm,3.5pm或效能相當的色譜柱);以乙腈-0.2mol/L磷酸氫二鉀溶液(用磷酸調節pH值至0)-水(35:5:60)為流動相A,以乙腈-0.2mol/L磷酸氫二甲溶液(用磷酸調節pH值至7.0)-水(50:5:45)為流動相先以流動相A等度洗脫,待紅霉素B洗脫完畢后立即按下表進行線性梯度洗脫;流速為每分鐘1.0ml;柱溫為65℃;檢則波長為210nm;進樣體積100ml時間(分鐘)流動相A(%)流動相B(%)100100tat100tg+10tg+200注:tkg為紅霉素B的保留時間 系統適用性要求系統適用性溶液(1)色譜圖中,紅霉素A峰的拖尾因子應不大于2.0。系統適用性溶液(2)色譜圖,應與紅霉素系統適用性對照品的標準圖譜一致,紅霉素A峰的保留時間約為23分鐘,雜質A雜質B雜質C雜質D、雜質E與雜質F的相對保留時間分別約為0.4、0.5、0.9、1.2.3和1.8,紅霉素B與紅霉素C的相對保留時間分別約為1.7和0.5,雜質B峰與紅霉素C峰、紅霉素B峰與雜質F峰間的分離度應不小于1.2,雜質C峰與紅霉素A峰間的分離度應符合要求。靈敏度溶液色譜圖中,主成分色譜峰高的信噪比應大于測定法精密量取供試品溶液與對照溶液,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖。限度供試品溶液色譜圖中如有雜質峰,雜質C峰面積不得大于對照溶液主峰面積的3倍(3.0%),雜質E與雜質F校正后的峰面積(乘以校正因子0.08)均不得大于對照溶液主峰面積的2倍(2.0%),雜質D校正后的峰面積(乘以校正因子2)不得大于對照溶液主峰面積的2倍(2.0%),雜質A、雜質B及其他單個雜質的峰面積均不得大于對照溶液主峰面積的2倍(2.0%),各雜質校正后的峰面積之和不得大于對照溶液主峰面積的7倍(7.0%),小于靈敏度溶液主峰面積的峰忽略不計。硫氰酸鹽照紫外可見分光光度法(通則0401)測定供試品溶液取本品約0.1g,精密稱定,置50ml棕色瓶中,加甲醇20m溶解,再加三氯化鐵試液1ml,用甲醇稀釋至刻度,搖勻對照品溶液取105℃干燥1小時的硫氰酸鉀2份,各約0.1g,精密稱定,分別置兩個50m量瓶中,加甲醇20ml溶解并稀釋至刻度,搖勻,精密量取5ml,置50ml量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,搖勻,再精密量取5ml,置50ml棕色瓶中,加三氯化鐵試液1ml,用甲醇稀釋至刻度,搖勻空白溶液量取三氯化鐵試液1ml,置50ml棕色瓶中,用甲醇稀釋至刻度。測定法取供試品溶液、對照品溶液與空白溶液,在492nm的波長處分別測定吸光度(均應在30分鐘內測定),兩份對照品溶液單位重量吸光度的比值應為0.985~1.015。限度硫氰酸鹽的含量不得過0.3%。硫氰酸根與硫氰酸鉀的分子量分別為58.08與97.18水分取本品約0.2g,加10%的咪唑無水甲醇溶液使溶解,照水分測定法(通則0832第一法1)測定,含水分不得過6.0%。熾灼殘渣不得過0.2%(通則0841)紅霉素組分照高效液相色譜法(通則0512)測定供試品溶液取本品約40mg,精密稱定,置10m量瓶中,加甲醇4ml使溶解,用pH8.0磷酸鹽溶液稀釋至刻度,搖勻。標準品溶液(1)取紅霉素標準品約40mg,精密稱定,置10ml量瓶中,加甲醇4ml使溶解,用pH8.0磷酸鹽溶液稀釋至刻度,搖勻。 標準品溶液(2)精密量取標準品溶液(1)1ml,置100ml量瓶中,用pH8.0磷酸鹽溶液-甲醇(3:2)稀釋至刻度,搖勻。pH8.0磷酸鹽溶液、系統適用性溶液(1)、系統適用性溶液(2)、色譜條件見有關物質項下系統適用性要求除靈敏度要求外,其他見有關物質項下測定法精密量取供試品溶液與標準品溶液(1)、標準品溶液(2),分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖。限度按外標法以標準品溶液(1)中紅霉素A的峰面積計算供試品中紅霉素A的含量,按無水物計,不得少于93.0%;按外標法以標準品溶液(2)中紅霉素A的峰面積計算供試品中紅霉素B和紅霉素C的含量,按無水物計,均不得過3.0%。