細菌的生化反應檢測

不同細菌  由于所含的酶系統不完全相同，因而對營養物質的分解能力及代謝產物亦不一致，據此，可用以鑒別細菌的種類。

一、單糖發酵試驗

【原理】

單糖發酵是將葡萄糖，乳糖或麥芽糖等分別加入蛋白胨水培養基內，使其最終濃度為0.75~1％。并加入一定量酚紅指示劑及小倒管，制成單糖發酵管，接種細菌經37℃培養18~24小時，若能分解糖產酸則酚紅指示劑由紅變黃，若能分解甲酸有CO2和H2等氣體形成，小倒管內則聚集有氣泡；不分解，則指示劑不變色。

【材料】

1．菌種：大腸桿菌，傷寒桿菌18~24小時瓊脂  斜面培養物。

2．培養基：葡萄糖發酵管，乳糖發酵管等。

【方法】

1．將傷寒桿菌，大腸桿菌  按照液體接種方法分別接種于葡萄糖及乳糖發酵管內。

2．置37℃孵箱培養18~24小時。

3．觀察結果：由于一些細菌能分解某種糖類產酸，所以培養基中PH下降到7.0以下，在酚紅指示劑的顯示下，培養基顏色由紅變黃。產酸者以“+”表示，如果同時產生氣體，則培養基中小倒管內有氣泡出現，此乃產酸又產氣，以“⊕”表示，不分解，則指示劑不變色，用“-”表示。

【結果】

傷寒桿菌大腸桿菌

葡萄糖+⊕

乳 糖-⊕

二、V-P(Voges-Proskauer)試驗

【原理】

有些細菌如產氣桿菌，分解葡萄糖產生丙酮酸，丙酮酸脫羧，生成乙酰甲基甲醇，在堿性環境中被氧化為二乙酰，再與培養基內胍基結合，生成紅色化合物，V—P試驗陽性。

【材料】

1．菌種：大腸桿菌，產氣桿菌18~24小時瓊脂斜面培養物。

2．培養基：葡萄糖蛋白胨水培養基。

3．試劑：V-P試劑