細菌的生化反應檢測

不同細菌由于所含的酶系統不完全相同，因而對營養物質的分解能力及代謝產物亦不一致，據此，可用以鑒別細菌的種類。
一、單糖發酵試驗
【原理】
單糖發酵是將葡萄糖，乳糖或麥芽糖等分別加入蛋白胨水培養基內，使其最終濃度為0.75~1％。并加入一定量酚紅指示劑及小倒管，制成單糖發酵管，接種細菌經37℃培養18~24小時，若能分解糖產酸則酚紅指示劑由紅變黃，若能分解甲酸有CO ₂ 和H ₂ 等氣體形成，小倒管內則聚集有氣泡；不分解，則指示劑不變色。
【材料】
1．菌種：大腸桿菌，傷寒桿菌18~24小時瓊脂斜面培養物。
2．培養基：葡萄糖發酵管，乳糖發酵管等。
【方法】
1．將傷寒桿菌，大腸桿菌按照液體接種方法分別接種于葡萄糖及乳糖發酵管內。
2．置37℃孵箱培養18~24小時。
3．觀察結果：由于一些細菌能分解某種糖類產酸，所以培養基中PH下降到7.0以下，在酚紅指示劑的顯示下，培養基顏色由紅變黃。產酸者以“+”表示，如果同時產生氣體，則培養基中小倒管內有氣泡出現，此乃產酸又產氣，以“?”表示，不分解，則指示劑不變色，用“-”表示。
【結果】
傷寒桿菌大腸桿菌
葡萄糖+?
乳 糖-?
二、V-P(Voges-Proskauer)試驗
【原理】
有些細菌如產氣桿菌，分解葡萄糖產生丙酮酸，丙酮酸脫羧，生成乙酰甲基甲醇，在堿性環境中被氧化為二乙酰，再與培養基內胍基結合，生成紅色化合物，V—P試驗陽性。
【材料】
1．菌種：大腸桿菌，產氣桿菌18~24小時瓊脂斜面培養物。
2．培養基：葡萄糖蛋白胨水培養基。
3． 試劑 ：V-P 試劑 [40％氫氧化鉀水溶液(內含0.3％肌酸)和6%α-奈酚酒精溶液]。
【方法】
1. 分別接種大腸桿菌，產氣桿菌于兩支葡萄糖蛋白胨水中。
2. 置37℃培養48小時后，取出分別加入KOH1ml和α-奈酚溶液1ml ,搖勻，靜置 試管 架上5~15分鐘。
3. 觀察結果：培養液變為紅色為陽性，不變色為陰性。
【結果】