維生素的液相色譜分離分析檢測

維生素是人體內代謝過程中起重要作用的物質，人體所需維生素量很少，但卻是構成生命活動不可缺少的營養物質，除少數維生素可在人體內合成外，大多數維生素都必需由食物中攝取。

維生素種類很多，在化學結構上并無共性，它們可為膠類（Vb1），醛類（Vb6）或醇類（Va）。根據其物理性質可分為水溶性維生素（如Vc，Vb1、Vr2）和油溶性維生素（如Va，Vd，Ve）兩大類。

用反相離子對色譜分離水溶性維生素如圖6-4-44所示。色譜柱為Biophase ODS（5μm，φ4.6mm*250mm），流動相：（A）1% 乙酸 + 0.5%三乙胺溶液（pH=4.5）；（B）A + 甲醇（50:50）。梯度洗脫程序在0-10min 內，流動相 B 由 0 增至，再維持15min。流量為1mL/min，用UVD（275nm）檢測。樣品溶于流動相 A 中進樣。三乙胺的濃度對Vb1、Vb6、煙酸和Vk3的分離影響很大；Vk3樣品中應加入Na2SO3以避免2- 甲基萘醌的生成；Vr12和煙酸在一起時不穩定應在測定時現配現用。

水溶性維生素也可在反相鍵合相柱（C8）或胺基鍵合相柱（μ- Bonddapak - NH2）實現分離。

油溶性維生素可用反相鍵合相柱分離，見圖6-4-45。色譜柱為Permaphase OSE（30μm（薄殼型），φ2.1mm*1000mm），流動相 A 為H2O；B 為CH3OH。梯度洗脫程序是 B 以5%/min的梯度增加；流量為2mL/min；柱溫 70℃；用UVD（254nm）檢測。

維生素 E（生育酚）的α、β、γ、δ異構體可用反相鍵合相柱進行分離，見圖6-4-46。色譜柱為Lichrospher WP200 - C30(3μm，孔徑20mn，φ4.6mm*250mm）；流動相為甲醇；流量分別為（a）1mL/min 和（b）0.3mL/min。用UVD（295nm）檢測。