照高效液相色譜法（附錄Ⅴ D）測定。 色譜條件與系統適用性試驗 用辛基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液-0.0025mol/L庚烷磺酸鈉溶液-乙腈（5：5：2）為流動相；檢測波長為 220nm。理論板數按嗎啡峰計算不小于1000。固相萃取柱系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充物，以測定法中相同的處理條件和洗脫條件試驗。精密量取濃度為每1ml中約含0.5mg的嗎啡對照品溶液0.5ml，置處理后的固相萃取柱上，同法洗脫，用5ml量瓶收集洗脫液至刻度，搖勻。精密量取該洗脫液與含量測定項下的對照品溶液各10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。
洗脫液與對照品溶液色譜圖中嗎啡峰面積的比值應在0.97~1.03之間。 測定法 取固相萃取柱一支，依次用甲醇-水（3：1）15ml與水5ml沖洗，用pH 值約為9的氨水溶液（取水適量，滴加氨試液至pH值為9）沖洗至流出液pH約為9，待用。取本品約10g，研成粗粉（過80目篩），精密稱取1g，置20ml量瓶中，加5% 醋酸溶液適量，超聲處理30分鐘使嗎啡溶解，取出，放至室溫，用55醋酸溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續濾液0.5ml，置上述固相萃取柱上，滴加氨試液適量使柱內溶液的pH值約為9（上樣前，另取同體積的續濾液預先試驗，以確定滴加氨試液的量），搖勻，待溶劑滴盡后，用水20ml沖洗。以含10%甲醇的5% 醋酸溶液洗脫，用5ml量瓶收集洗脫液至刻度，搖勻，精密量取10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。
另取嗎啡對照品適量，精密稱定，用含有10%甲醇的5%醋酸溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中約含嗎啡0.05mg 的溶液，搖勻，同法測定。按外標法以峰面積計算，即得。