排空膀胱后取仰臥位。腹部消毒應以穿刺點為中心向外圍擴大，半徑不小于10㎝。鋪無菌孔巾。穿刺點局部以0.5%利多卡因浸潤麻醉。持7號無菌腰穿針垂直刺入。經腹壁及子宮壁兩次阻力，進入羊膜腔時有組織抵抗突然消失的落空感。拔出針芯即有羊水流出，用注射器抽取羊水約20ml，按需要立即送檢。隨后拔除穿刺針，用棉球和紗布蓋住針孔，加壓5分鐘后膠布固定。
