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    發布時間:2022-05-26 16:12 原文鏈接: 自噬流怎么檢測

    1.檢測LC3II/LCI: lc3參與自噬的形成,自噬形成時,胞漿型LC3(即LC3-I)會酶解掉一小段多肽,轉變為(自噬體)膜型(即LC3-II),LC3II升高代表自噬的啟動;

    2.檢測P62:P62可以通過自噬來降解,因此P62可以反映自噬的強弱。當LC3 II升高,P62同時降低,表明自噬流通暢;如果LC3II 升高,P62升高,表明自噬起始正常,但下游不通,吞噬體和溶酶體不能融合。

    3.除此之外,當自噬減退,如何鑒別其發生在自噬形成階段OR自噬降解障礙呢?
    可以通過RFP-GFP-LC3雙標腺病毒檢測。GFP在酸性環境中降解,紅綠熒光merge后通過merge后出現的黃色斑點即只是自噬體.紅色的斑點指示自噬溶酶體。如吞噬體和溶酶體能正常融合,那么紅色熒光多于黃色熒光,如自噬下游阻滯,吞噬體和溶酶體不能正常融合,則主要為黃色熒光。

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