色譜法檢測維生素類藥物及其制劑含量

維生素B₆又名鹽酸吡哆醇,藥典二部規定用高效液相色譜法測定維生素B₆及其制劑的含量。維生素E含量測定方法很多,目前,各國藥典多采用氣相色譜法,該法簡便、快速、專屬性。藥典收載的維生素E及其制劑均采用氣相色譜法測定含量。

1.維生素B₆的含量測定方法照高效液相色譜法測定。

色譜條件與系統適用性試驗:用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,以0.04%戊烷磺酸鈉溶液(用冰醋酸調節pH至3.0)-甲醇(85:15)為流動相,檢測波長為291nm。理論板數按維生素B₆峰計算不低于4000。

測定法取本品,精密稱定,加流動相溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.1mg的溶液,精密量取10μl注入液相色譜儀,記錄色譜圖,另取維生素B₆對照品,同法測定。

按外標法以峰面積計算,即得,按干燥品計算,含C₈H₁₁NO₃·HCl應為98.0%~102.0%。維生素B₆的含量按式計算。

A_s為供試品的峰面積;A_r為對照品的峰面積;D_s為供試品溶液的稀釋倍數;D_r為對照品溶液的稀釋倍數;m_s為供試品的稱樣量;m_r為對照品的稱樣量;V_r為

對照品溶液的定容體積;V_s為供試品溶液的定容體積。

2.維生素E的含量測定方法由于氣相色法操作簡便、快速、專展性強,所以

目前藥典收載的維生素E及其制劑均采用氣相色譜法測定含量。

色譜條件與系統活用性試驗:用硅酮(OV-17)為固定相,涂布濃度為2%的填充柱,或用100%二甲基聚硅氧烷為固定相的毛細管柱,柱溫為265℃。理論板數按維生素E峰計算不低于500(填充柱)或5000(毛細管柱),維生素E峰與內標物質峰的分離度應符合要求。

校正因子的測定:取正三十二烷適量,加正己烷溶解并稀釋成每1ml中含10mg的溶液,作為內標溶液。另取維生素E對照品的20mg,精密稱定,置棕色具塞瓶中,特密加內標溶液10ml,密塞,振搖使溶解,取1-3μl注入氣相色譜諧儀,按式計算校正因子。

式中,A_S為內標物質的峰面積;A_r為對照品的峰面積;C_s為內標溶液的濃度;Cr對照品溶液的濃度。

測定法:取本品約20mg,精密稱定,置棕色具塞瓶中,精密加內標溶液10ml,密塞,振搖使溶解,取1-3μl注入氣相色譜儀,測定,計算,即得。本品含 C₃₁H₅₂O₃應為 96.0%～102.0%。