一、藥敏試驗的目的
藥敏試驗是使用體外試驗的方法檢測細菌的耐藥性,預測抗菌藥物的臨床治療效果,在藥物種類的選擇上為臨床醫生提供幫助,以實施個體化治療。
當前,“對癥下藥”已經變得難以奏效。首先,致病菌的種類發生了改變,一種疾病可以由多種病原菌所引起,包括致病菌和條件致病菌;其次,感染人群發生變化,從健康人群到老年人、長期使用激素、免疫抑制劑及放療、化療的人群,臨床癥狀常常不典型;最后,早期不規范使用抗生素,也會導致臨床癥狀不典型。
與此同時,“對菌下藥”又難以獲得滿意效果。耐藥菌尤其是多重耐藥菌的出現,使臨床醫師按照抗生素的作用機制選擇1~2種抗菌藥物不能覆蓋常見的病原菌。因此,藥敏試驗成為臨床工作的重要手段之一。
二、哪些細菌需要做藥敏試驗?
對任何分離的可疑病原菌,若不能從該菌的種屬特征可靠地推知其對抗菌藥物的敏感性,就需要進行藥敏試驗。以下情況不必進行藥敏試驗:正常定植菌與感染的關系不明確時;污染菌;已知細菌對某種抗生素天然耐藥;已知細菌對某種抗生素全部敏感。
三、藥敏試驗中藥物的選擇
主要根據細菌種類和抗生素作用機制選藥。選擇試驗的藥物應具有確切的臨床療效,試驗藥物的體外試驗結果可以接受,并且試驗藥物具有代表性。
目前我國臨床實驗室采用美國國家標準化委員會(NCCLS)/美國臨床實驗室標準化研究所(Clinical and Laboratory Standards Institute , CLSI)藥敏試驗執行標準選藥。
NCCLS抗生素選擇分組為:
A組:為首選藥物,作常規試驗和報告。
B組:為首選藥物,可與A組藥物平行作藥敏試驗,但只在以下情況下進行選擇性報告:細菌對A組抗生素耐藥,病人對A組抗生素過敏,嚴重感染或多部位、多種細菌混合感染,要獲得耐藥性監測資料。
C組:為備選藥物,作為替代或補充,在下列情況下使用:對一個或多個首選藥耐藥的地區流行株感染,對不常見菌感染的治療,控制傳染病的流行,獲得耐藥性監測資料。
U組:為備選藥物,僅用于尿路感染的治療。
四、藥敏試驗所采用的方法
常用的試驗方法包括紙片擴散法、稀釋法、自動化儀器法、E-TEST(濃度梯度法)。
五、細菌的主要耐藥機制
1、產生水解酶,如β-內酰胺酶、鈍化酶。
2、細菌上與抗生素的結合靶位改變,如青霉素結合蛋白2a。
3、細菌表面通道蛋白改變,可以使其滲透性發生改變。
4、細菌產生泵出機制。
5、其他機制,如病原菌產生生物被膜、休眠狀態等。
六、臨床常見病原菌的歸屬和分類
臨床常見病原菌主要包括以下四大類:
1、 革蘭陽性球菌:如葡萄球菌屬、腸球菌屬。
2、 革蘭陰性桿菌:如腸桿菌科細菌(大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、腸桿菌屬、枸櫞酸桿菌屬)和非發酵菌(銅綠假單孢菌、不動桿菌)。
3、 革蘭陰性球菌:如奈瑟菌。
4、 革蘭陽性桿菌:如棒狀桿菌。
七、關于葡萄球菌
(一)葡萄球菌藥敏試驗板
葡萄球菌藥敏試驗板包含的抗生素見表1。
(二)葡萄球菌藥敏試驗結果解釋及抗生素選擇
1、結果的判定
主要根據青霉素、苯唑西林及萬古霉素的結果進行判斷和選藥,可分為:青霉素(S);青霉素(R)苯唑西林(S);青霉素(R)苯唑西林(R)萬古霉素(S)。
2、抗生素的選擇
(1)青霉素(S):表示對青霉素類、頭孢菌素類均敏感。因此,青霉素為首選抗生素,可選擇一代頭孢。
(2)青霉素(R)苯唑西林(S):表示對不耐酶的青霉素耐藥,但對耐酶青霉素頭孢類抗生素敏感。可使用耐酶青霉素,如苯唑西林,氯唑西林;或使用酶抑制劑組成的復方制劑,如氨芐西林+舒巴坦;或使用一代、二代頭孢。
(3)青霉素(R)苯唑西林(R),即MRS,約占40%-70%。為對所有的青霉素類、頭孢類和其他β-內酰胺類抗生素均耐藥,此外對喹諾酮類和大環內酯類抗生素交叉耐藥,嚴重感染唯一有效抗生素是萬古霉素。因此,對于輕癥感染可選擇喹諾酮類、四環素類、復方磺胺、磷霉素等聯合用藥;重癥感染可選擇糖肽類,如萬古霉素或替考拉寧聯合利福平;尿路感染可以選擇呋喃妥因、復方磺胺、環丙沙星。
3、臨床應用
對于以葡萄球菌感染為主的醫院獲得性肺炎、細菌性腦膜炎的治療可以參見以下表2及表3。
八、關于腸球菌屬
(一)腸球菌屬藥敏試驗板
腸球菌屬藥敏試驗板所選擇的抗生素見表4。
(二)腸球菌屬藥敏結果解釋及抗生素選擇
1、結果的判定
根據青霉素、萬古霉素和高濃度氨基糖肽類抗生素敏感試驗結果判斷,可分為:青霉素(S);青霉素(R)萬古霉素(S);青霉素(R)萬古霉素(R);高濃度氨基糖苷類(S);高濃度氨基糖苷類(R)。
2、抗生素的選擇
(1)青霉素(S)/氨芐青霉素(S):輕癥感染可選擇青霉素、氨芐青霉素;重癥感染可選擇高劑量青霉素或氨芐青霉素聯合,氨基糖苷類,亞胺培南。
(2)氨芐青霉素(R)萬古霉素(S):其嚴重感染可以選擇萬古霉素聯合氨基糖苷類抗生素。
(3)氨芐青霉素(R)萬古霉素(R):即VRE,可以選擇壁霉素/新生霉素聯合慶大霉素、氟喹諾酮類治療;或利福平、四環素、紅霉素、氯霉素也可作為聯合用藥;或可選擇奎奴普丁/達福普丁、泰利霉素等。
(4)尿路感染:可以選擇喹諾酮類、呋喃類。
(5)高濃度氨基糖苷類(S):表示可以用青霉素、氨芐青霉素或萬古霉素與氨基糖苷類聯合用藥。
(6)高濃度氨基糖苷類(R):表示青霉素、氨芐青霉素或萬古霉素與氨基糖苷類聯合用藥無效。
3、臨床應用 見表5。
九、關于革蘭陰性菌
(一)革蘭陰性菌藥敏試驗板
革蘭陰性菌藥敏試驗板所用抗生素見表6。
(二)腸桿菌科細菌藥敏結果解釋及抗生素選用
1、結果的判定
主要根據頭孢菌素類、氨基糖苷類及頭霉素藥敏結果進行判斷,可分為:一代頭孢菌素類(S),氨基糖苷類(S);一代(二代)頭孢(R),三代頭孢(S);三代頭孢(R),頭孢西丁(S);三代頭孢(R),頭孢西丁(R),亞胺培南(S)。
2、抗生素的選擇
(1)頭孢菌素類(S),氨基糖苷類(S):輕癥感染可選擇慶大霉素,氨芐青霉素,哌拉西林,一代頭孢;重癥感染可選擇三代頭孢。
(2)一代(二代)頭孢(R),氨基糖苷類(R),三代頭孢(S):可以選用三代頭孢。
(3)三代頭孢(R)頭孢西丁(S):提示可能為ESBLs,對所有青霉素類、頭孢菌素類和氨曲南均耐藥。可以選擇碳青霉烯類(如亞胺培南、美洛培南),頭霉素類(如頭孢西丁), β-內酰氨酶抑制劑組成的復方制劑(如哌拉西林/舒巴坦(舒普深))。易產生ESBLs的菌株主要是:大腸埃希菌、克雷伯菌和奇異變性桿菌。
(4)三代頭孢(R),頭孢西丁(R):提示可能為高產AmpC酶,對所有青霉素類、頭孢菌素類和氨曲南及頭霉素均耐藥。可以選用碳青霉烯類(如亞胺培南、美洛培南)或四代頭孢(頭孢吡肟)。易產生誘導型AmpC酶的菌株主要有:腸桿菌屬、沙雷菌屬、枸櫞酸桿菌屬。而高產AmpC酶的產生與抗生素誘導有關,三代頭孢、克拉維酸、亞胺培南均為強誘導劑。
3、臨床應用
與腸桿菌科相關的醫院獲得性肺炎和敗血癥的治療見表7和表8。
(三)關于非發酵菌感染
1、非發酵菌感染的特點
非發酵菌感染以銅綠假單胞菌感染最多見,其次有不動桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌和洋蔥伯克菌。是最常見也是最嚴重的醫院感染,該菌很容易產生耐藥性,所以治療很困難,需根據藥敏試驗結果選藥。
2、銅綠假單胞菌藥敏結果解釋及抗生素選用
(1)該菌有多種耐藥機制存在,應根據藥敏試驗結果選擇治療藥物。并且該菌在治療過程中很容易產生耐藥性,所以治療3~4天后需重新分離細菌做藥敏。
(2)由于該菌耐藥率高,一般選擇聯合用藥,可以選擇以下聯合用藥方案:三代、四代頭孢+氨基糖苷類(以頭孢他啶最好);亞胺培能+氨基糖苷類;脲基青霉素(羧芐、哌拉、替卡、美唑西林)+氨基糖苷類;酶抑制劑的復合制劑+氨基糖苷類。
(3)臨床應用 見表9。