1.樣品液制備:取材料莖部1 g加兩倍冷純凈水,在冰箱預先冷卻的研缽中充分研成勻漿,然后離心(3500 r/ min,20 min),加等體積甘油和少許溴酚藍指示劑即可。 2.凝膠制備(按“常規聚丙烯酰胺凝膠電泳”),加樣量40μl/孔,電壓180 V,電泳時間2.5~3 h。 3.染色:0.5 g聯苯胺溶于250 ml 10%冰乙酸,配成聯苯胺母液。1.35 g愈創木酚溶于250 ml 10%冰乙酸,配成母液。染色液為100 ml 0.2mol/L乙酸鈉溶液,10 ml 5 mmol/L硫酸錳溶液,25 ml聯苯胺母液,40 ml愈創木酚母液,25 ml 0.12%過氧化氫溶液(臨用前配制)。凝膠洗出后轉移至染色液中,37 ℃恒溫下放置30 min,顯色后,置7%乙酸中保存,繪圖或照相。
展開 |