血型檢測中ABO血型正反定型不符影響因素分析

作者：劉立坤
作者單位：河北醫科大學第三醫院輸血科

       【摘要】  目的應用血型血清學方法分析造成ABO血型正反定型不符的原因，并提出解決方法。方法 應用正反定型、吸收放散試驗和唾液血型物質測定試驗檢測ABO血型正反定型不符標本。分析正反定型不符的原因，并進行正確的紅細胞分型。結果 共檢查ABO血型正反定型不符標本43例，其中冷自身抗體20例，血漿成分異常7例，亞型6例，抗體缺失及減弱2例，AB抗原性減弱6例，因輸血或妊娠發生同種抗體2例。結論 對ABO血型正反定型不符無法定型的血液樣本，可以采用其他輔助手段正確鑒定ABO血型，從而保證輸血的安全性。

       【關鍵詞】  ABO血型系統；正反定型；血型鑒定

       ABO血型系統是最早發現也是輸血中最重要的血型系統，正確鑒定紅細胞血型是確保臨床輸血安全的首要條件，但在臨床實際工作中，常出現ABO血型正反定型不符的現象。本文對我院2009年1月以來ABO正反定型不符的樣本進行分析報告如下。

       1、資料與方法

       1.1  一般資料

       我院2009年1月以來住院及門診患者血型檢查者共5683例，其中ABO血型正反不符標本43例。

       1.2  試劑 
 
       抗A、抗B、抗A+B、抗H、抗A1血清、試劑紅細胞懸液AC、BC、OC 、A1C、A2C由長春博德生物制品研究所提供；不規則抗體篩檢紅細胞及譜細胞由上海血液生物醫藥有限責任公司提供。

       1.3  方法

       血型正反定型、吸收放散試驗、ABO亞型認定試驗、抗人球蛋白試驗、抗體鑒定試驗、唾液血型物質測定。以上試驗均按文獻［1］進行操作。

       2、結果
    
       通過對43例血液樣本進行ABO正反定型、吸收放散試驗、抗體鑒定試驗、抗人球蛋白試驗、唾液血型物質測定等試驗，發現造成ABO血型正反定型不一致的主要原因為冷自身抗體，占總數的46.5%，其它原因有血漿異常占16.3%，血型亞型及AB抗原性減弱均占13.9%，抗體缺失及減弱與同種抗體均占4.6%。見表1。

       3、討論
    
       在鑒定ABO血型時，如果發現正反定型不符，首先要嚴格按照操作規程，重新抽取一份新鮮標本并使用質量合格試劑重做一次試驗，在排除人為因素及技術問題［2］后，根據具體問題做分析。ABO血型正反定型不符的常見原因如下。

       3.1  冷自身抗體

       本實驗中由于冷自身抗體引起的正反定型不符標本有20例占46.5%，冷自身抗體是影響ABO血型定型正反不符最常見的原因。一般健康人血清中含有少量冷凝集素，且效價很低，一般在1∶16以下，在4℃下活性最強，28℃通常不凝聚，但在某些病理條件下，如支原體肺炎、傳染性單核細胞增多癥、病毒性肺炎、再生障礙性貧血惡性變、自身免疫性溶血性貧血、紅斑狼瘡等患者血清中具有高效價的病理性自身冷抗體，作用溫度可升高到36℃，通常造成ABO正反定型出現全凝集現象，無法鑒定血液樣本的ABO血型。如出現這種現象，可將紅細胞和血清分別在37℃預溫，并在此條件下進行定型試驗。對于自身紅細胞已凝集的情況，可用37℃的0.9%氯化鈉溶液反復洗滌后再進行紅細胞定型試驗。對于血清中存在的冷自身抗體可用自身紅細胞反復吸收致紅細胞不凝集，再進行ABO反定型試驗。在冷自身抗體效價太高、血液樣本已凝固的情況下，可用巰基乙醇處理紅細胞再進行ABO正定型試驗［3］。表1  43例ABO血型正反定型不符的原因與結果（略）

 3.2  血漿成分異常

       本實驗中血漿成分異常標本有7例占16.3%，某些肝臟病、多發性骨髓瘤等疾病的患者存在大量異常球蛋白，某些紅細胞沉降率增快的疾病又可引起纖維蛋白增高，某些藥物如右旋糖苷、聚維酮、羥乙基淀粉等主要為血漿擴溶劑［4］，以上因素均易使紅細胞發生緡錢狀凝集。此時可加1滴0.9%氯化鈉溶液混勻，假凝集即可消失（真凝集不受影響），如果加鹽水后仍不消失，可用抗人球蛋白法重新鑒定，即可避免發生假凝集。更嚴重的假凝集可用0.9%氯化鈉溶液置換法，即將血清和細胞混合離心后棄去上清，再加等量0.9%氯化鈉溶液1或2次后，假凝集即可消失。

       3.3  抗體減弱或缺失

       占2例（4.7%），老年人、白血病、骨髓瘤患者、長期接受免疫抑制劑治療、燒傷、丙種球蛋白缺乏癥等都能導致患者抗體減弱，抗體水平下降或消失，會造成反定型困難。如果抗體只是減弱，反定型可以通過增加反應時間或加大血清量并在4℃下放置5～10 min后再進行試驗，觀察結果。新生兒在出生后才產生抗體，在6個月內自身抗體效價很低反定型可能不凝集或凝集很弱，故新生兒做反定型意義不大。

       3.4  抗原性減弱

       本文中抗原減弱占6例（13.9%），白血病和有些疾病能引起紅細胞抗原性減弱，造成正定型凝集較弱，引起血型誤定。可以增加反應時間，在4℃下放置后再做鑒定，此時有必要增做吸收放散試驗、唾液血型物質檢測實驗。并注意與亞型區別。

       3.5  血型亞型

       實驗中血型亞型占6例（13.9%），在健康的獻血者和體檢者中，亞型是造成ABO血型正反定型不符的主要原因。由于ABO亞型的紅細胞抗原性減弱，抗A或抗B的試劑有時不能檢測出其抗原性，造成定型困難。其鑒定的主要方法有：在紅細胞正定型中加做抗A+B、抗A1、抗H，并觀察紅細胞與其凝集的強度；在反定型中加做A1C、A2 C；同時加做吸收放散試驗，亞型細胞一般具有吸收能力弱而放散能力強或吸收能力強放散能力弱的特點；另外唾液血型物質的檢測，也有助于ABO亞型的定型。

       3.6  同種抗體

       本文中同種抗體占2例（4.6%），同種抗體在人群中檢出率為0.3%～2.0%，一般通過妊娠、輸血或人體計劃免疫產生［5］，引起ABO血型正反定型不一致的同種抗體主要是有Rh、MN、P等血型系統的抗體，當反定型出現OC凝集而自身對照細胞陰性結果時，應考慮到同種抗體的可能性，應用篩選細胞和譜細胞加做抗體篩選及鑒定，本試驗中2例同種抗體均為抗E抗體。
    
       除以上因素外，標準血清效價太低、親和力不強，紅細胞懸液過濃、過淡，抗原抗體比例不合適均可以出現弱凝聚或不凝集的現象而導致血型判斷錯誤。
    
       因此在工作中，我們應該仔細核對患者標本，必要時應詳細詢問患者病情及病史，及時更新輸血專業知識，準確鑒定ABO血型，有效地保障臨床輸血安全。

       【參考文獻】

       1 李勇，楊貴貞主編.人類紅細胞血型學實用理論與實驗技術.第1版.北京：中國科學技術出版社，1999.279283.

       2 王金敏，劉世榮，喬家駿，等主編.中國輸血技術操作規程.第1版.天津：天津科學技術出版社，1998.6162.

       3 毛偉，王芳，程磊，等.ABO血型正反定型不一致原因分析.重慶醫學，2007，36：21482149.

       4 周湘靜，陳碧樂，謝作聽，等.37例血漿因素引起正反定型不符原因分析.重慶醫學，2006，35：452454.

       5 黎海瀾，焦偉.輸血前患者紅細胞血型同種抗體篩查與分析.國際輸血及血液學雜志，2008，31：2223.