對新生兒可疑菌血癥,還應同時做尿液和腦脊液培養。
老年菌血癥患者可能不發熱或體溫不低,如伴有身體不適、肌痛或卒中,可能是感染性心內膜炎的重要指征。
1.1.2 血培養的標本采集時機:
只要懷疑患者有血流感染的可能,在考慮使用抗菌藥物之前,都應立即采集血培養標本。若患者已行抗菌藥物治療,則應選擇含有抗菌藥物吸附物的培養瓶,并在下一次抗菌藥物應用前采血培養。細菌通常在寒戰和發燒前1小時入血(但目前這條仍存在一定爭議,有些文獻證明時間與檢出率是呈相關性的,可也有文獻說時間對檢出率的影響不大,但對心內膜炎的病人來說采血時間與血培養的檢出率是呈相關性的),此時為采集血培養標本進行病原菌培養的最佳時機。
1.1.3 血培養的次數:
要求:對懷疑菌血癥、真菌血癥的成人患者,推薦同時或短時間間隔(10分鐘內)從不同部位(如雙臂)采集2~3套血培養標本,做到“雙瓶雙側”。如有必要,可同時或短時間間隔內從下肢靜脈采血接種第三套培養瓶。在采集血培養后的2至5天內,不需要重復采集血培養
只有在疑似感染性心內膜炎或導管相關性感染患者的連續性菌血癥時在不同時間點采血才有必要。
嬰幼兒患者,需要同時采集2次(不同部位)血培養標本,皆以需氧瓶為主。
說明:以一個需氧瓶和一個厭氧瓶為一套血培養,作為常規血培養組合。所謂“雙瓶雙側”,是指從一個部位采血接種一套培養瓶,再從另一部位采血接種另一套培養瓶。一次靜脈采血注入到多個培養瓶中應視為單個血培養。
研究表明,只做1套血培養,病原菌的檢出率僅為65%,兩套血培養為80%,三套血培養為96%。單瓶或單套血培養不僅檢出率不高,而且難以區分污染導致的假陽性,結果很難做出臨床解釋,應該堅決予以廢除。
在抗菌藥物治療開始后的2至5天內,血液中的細菌不會立即清除。一般菌血癥或真菌血癥的患者可通過臨床表現來判斷療效,也可再次送檢血培養進行預后監測,尤其是在:一.細菌性心內膜炎患者,對于其菌血癥或真菌血癥是否被清除,連續血培養可被用于評估和指導治療;二.與感染性心內膜炎無關的金黃色葡萄球菌血癥,對其陽性血培養的48至96小時追蹤可以很好地預測復雜的金黃色葡萄球菌血癥[5]。
1.1.4 血培養的采血量:
要求:成年患者推薦的采血量為20~30ml, 每套不少于10ml,每瓶不少于5ml。嬰幼兒患者推薦的采血量應少于患兒總血容量的1%,每瓶不少于2ml。對于采用成品血培養瓶的實驗室,必須按照血培養瓶生產廠家的建議,采集足夠的血液標本。
說明:血培養采血量是影響病原菌檢出率的最重要的可變因素。一般情況下,成人菌血癥患者外周血中細菌濃度為1~10CFU/ml,成人血培養采血量在2~30ml之間時,病原菌檢出率與采血量成正比例增長。兒童患者同樣有數據表明檢出率與血培養的采血量成正相關,但由于兒童患者血液中病原菌濃度較高,一般約為成人血流感染病原菌濃度的10倍,血培養標本量無需等同于成人。但是,兒童也可能發生低水平的菌血癥,血培養采血量要根據患兒的血容量和年齡確定。
1.1.5 血液標本在需氧瓶和厭氧瓶中的分配
要求:以一個需氧瓶和一個厭氧瓶為一套血培養,作為常規血培養的組合。當采血量不夠推薦的采血量時,應首先滿足需氧瓶,剩余標本再接種入厭氧瓶。
說明:采用一個需氧瓶和一個厭氧瓶的血培養組合與采用2個需氧瓶的組合相比,可檢出更多的葡萄球菌、腸桿菌科細菌和厭氧菌。真菌和嚴格的需氧菌(如假單胞菌和嗜麥芽寡養單胞菌)幾乎全部只能從需氧瓶中分離到。
1.2 血培養標本的采集
1.2.1 皮膚消毒與防止血培養污染
要求:使用碘伏、碘酊、次氯酸或洗必泰作為血培養的皮膚消毒劑,碘酊的作用時間不能少于30秒,碘伏的作用時間則需要1.5~2分鐘。
說明:碘酊與洗必泰的效果大體相當。洗必泰的作用時間和碘酊一樣,但是沒有過敏反應,因此在靜脈穿刺完成后不必擦去,但不能用于小于2個月的嬰兒皮膚的消毒。對年齡小于2個月的新生兒,需使用70%的異丙基乙醇進行皮膚消毒。消毒劑需要有足夠的作用時間以保證消毒效果。
1.2.2 標本采集部位
要求:從兩側上肢靜脈采血,“雙瓶雙側”采血培養。必要時從下肢靜脈采血做第三套血培養。
說明:不建議采集動脈血,其診斷價值不高,且增加了抽血污染的機會。盡量避免從靜脈留置導管采血培養,因其常伴有高污染率。如果必須從留置導管內采血,也應同時從外周靜脈采集另外一個血培養標本以幫助陽性結果的判讀。
1.2.3 減少血培養污染的注意事項
要求:采血之前,血培養瓶的橡皮塞需使用70%異丙醇酒精消毒并干燥,然后再進行穿刺部位的皮膚消毒。
嚴格按照1.2.1所述皮膚消毒方法操作,并等待足夠消毒時間。
嚴格無菌操作,不允許在皮膚消毒后用手接觸待穿刺部位,除非帶有無菌手套。
不推薦采血后更換注射器針頭接種血培養瓶,采用真空采血裝置能降低污染率。
說明:無論采用何種采血方法,血培養可接受的污染率通常是≤3%。研究表明,經過專門培訓的熟練抽血者采集血培養的污染率為3%,而未經培訓的住院醫生和護士污染率則達11%。因此對臨床護士就血培養標本采集進行專門的、嚴格的培訓是非常必要的。
1.3 血培養標本的運送
要求:采血后應該立即送檢。如不能立即送檢,需室溫保存,切勿冷藏。 標本接種到培養瓶后,需輕輕顛倒混勻以防血液凝固。
說明:血培養瓶在接種前、接種后均不得冷藏或冷凍,否則會導致某些病原微生物死亡。接種后的培養瓶最好立即送到實驗室,最遲不能超過2小時。自動化連續監測系統雖有允許延遲上機監測微生物生長的原理,還是應該盡量減少延遲上機時間,否則可能導致檢測時間延長甚至假陰性結果。
1.4 血培養標本的拒收標準
遇到下列血培養標本應拒收并且要求重新采集標本:
1.血培養瓶上貼的標簽錯誤或未貼標簽。
2.血培養瓶滲漏、破裂或明顯污染。
3.血液凝固。