(1)受檢血清必須新鮮，如放置室溫2h以上，會使補體活性下降。
(2)補體的溶血活性受多種因素的影響，如綿羊紅細胞濃度及致敏抗體的量等。當每一致敏紅細胞吸附的抗體分子低于100時，紅細胞溶解程度隨細胞濃度的增加而減少。當用高濃度抗體致敏時，溶血程度隨細胞的增加而增加。紅細胞濃度增加一倍，可使50%溶血補體量增加25%左右。鈣、鎂離子的存在可穩定溶血系統。但含量過多時，反而抑制溶血反應。因此在進行試驗時，需對反應的各個環節作嚴格控制。
(3)本試驗不能測定補體蛋白的絕對值，也不能測定備解素系統中的成分。