酵母提純
酵母離心(8 000 r/min)15 min后收集菌體。將收集到的菌體用蒸餾水洗滌，離心，再洗滌，重復數次，直到菌體呈白色，傾出上清液，將不含雜質的干凈的酵母保存待用。
粗酶液的制備
準確稱取離心分離后的酵母10 g，加入60 mL 0．5 mmol/L的SDS溶液溶解，在pH值為5．5、50℃水浴中加熱12 h后取出，4℃、10 000 r/min離心20 min．上清液即為粗制酶液。4℃保存。
葡萄糖標準曲線的制定
以葡萄糖含量為橫坐標。以吸光度為縱坐標，繪制標準曲線。
蛋白質標準曲線的制定
以蛋白質含量為橫坐標。以吸光度為縱坐標。繪制標準曲線．
蔗糖酶活性的測定
稀釋酶液0．5 mL．加入0．3 mL pH值為4．6、0．1 mol/L的NaAc—HAc緩沖液．0．2 mL 0．1 mol/L的蔗糖溶液．37℃準確反應15rain后．加0．125 mL l mol/L的NaOH溶液中止反應。用DNS法在540 nm波長下測定形成的還原糖量。在該條件下。蔗糖酶液1 min轉化底物蔗糖生成1g葡萄糖定義為1個活力單位。
粗酶的乙醇初步分離
在所提粗制酶液中加入乙醇使其質量分數達30%，4℃放置過夜，4℃、10 000 r/min離心15 min．取上清液．追加乙醇使其質量分數達50%，4℃放置1 h，4℃、11 000 r/min離心15 min．棄上清液．沉淀用雙蒸水溶解．4℃保存。經SDS抽提法提取．質量分數50%的乙醇沉淀所得的酶液用透析法(pH值為7.0的0.05 mol/L%s—HCI緩沖液)充分透析。所得透析液4℃保存。
SDS抽提法提取啤酒酵母中蔗糖酶
工藝條件優化：在單因素試驗的基礎上。選取SDS摩爾濃度、pH值、提取溫度、提取時間4個條件，考察其對酵母蔗糖酶抽提效果的影響．采用4因素3水平正交表L934。做正交試驗。
蔗糖酶的純化
采用O一瓊脂糖凝膠FF陰離子交換柱層析純化粗酶液。將SDS抽提法提取出的蔗糖酶活性高的粗制酶液經質量分數50%的乙醇沉淀，溶解透析后，過Q-瓊脂糖凝膠FF陰離子交換柱(用pH值為7．0、0．05 mol/L Tris-HCl緩沖液充分平衡)。用0～1 mol/L、60 min線性梯度的NaCI溶液(內含pH值為7．0、0．05 mol/L%s-HCI緩沖液)洗脫。體積流量為0．5 mL/min，每管收集mL。測定各管洗脫液的蔗糖酶活性與蛋白質含量，合并蔗糖酶活力高的若干管流出液。流出液經過透析脫鹽,真空干燥后即為純化的酵母蔗糖酶。